目的：结直肠癌(Colorectal cancer，CRC)是最常见的恶性肿瘤之一，其发病率及死亡率都高居疾病排行榜的前五位。早期诊断是提高结直肠癌生存率的有效手段，但目前尚无便捷灵敏的诊断方法。基因改变的研究是结直肠癌诊断及治疗依据的研究方向之一。本文旨在应用PCR反应和DNA测序技术检测中国人结直肠癌中APC、P53、K-ras和PIK3CA基因的突变情况，分析它们分别与临床病理参数间的相关性，并研究这四个基因之间可能存在的相互关系，探讨其对于结直肠癌发生发展过程的影响。方法：本实验应用全基因组DNA的目的片段PCR扩增及DNA测序技术在79例结直肠癌患者手术切除标本中分别进行APC、P53、K-ras和PIK3CA基因的突变检测研究。①利用DNAPurification kit (Qiagen)提取基因组DNA，并用紫外分光光度计对DNA进行定量。②根据相关的经典文献，NCBI的基因库基因序列信息以及primer5引物设计软件针对相应基因进行引物设计。③利用相对应的引物摸索出恰当的条件后，分别进行APC、P53、K-ras和PIK3CA四个基因的PCR工作。④利用电泳鉴定PCR扩增获是否得了大小符合预期的特异性产物。⑤合格的产物送交测序公司进行Sanger测序。⑥对测序公司发回的结果进行分析，采用Chromas软件读取测序图谱和碱基序列，通过确认相应位点对应的氨基酸编码序列，最终确定每一标本基因点突变情况。⑦计算各基因的突变频率并分析其突变分布特点。⑧将各基因突变情况与临床病理参数（性别、年龄、淋巴结转移情况、病理分期和分级）相关性进行分析，并分析各基因突变间的相关性，以探讨这些基因突变对结直肠癌诊断或治疗所具有的临床意义。结果：实验结果显示，APC基因突变率25／79（31.6%），突变分布表现为区域密集，无典型的突变热点；P53基因突变率为25／79（31.6%），突变热点有密码子175（3／24），245（2／24），248（1／24），282（6／24）； K-ras基因突变具有最高的频率，为30／79（38.0%），突变热点为位于外显子1上的密码子12，13； PIK3CA基因突变率为7／79（8.9%），突变热点为密码子542，545，546，1047。对APC、P53、K-ras和PIK3CA四组基因突变结果分别与临床病理参数的相关性进行统计分析，均未发现具有统计学意义的分析结果；将四组基因突变的阳性数据相互之间进行相关性分析，亦未发现其突变之间存在明显的相互关系。提示这四组基因突变分别对于结直肠癌的发生发展具有推动性作用。实验结果表明，在中国人结直肠癌中存在相当比例的APC、P53、K-ras和PIK3CA基因突变频率，且其四组突变病例之间并不具有明显的正负相关性。结论：①中国人结直肠癌中APC，P53，K-ras基因突变频率，APC基因突变率25／79（31.6%），P53基因突变率为25／79（31.6%），K-ras基因突变具有最高的频率，为30／79（38.0%），各基因突变热点或突变密集区域分布基本与西方人群报道相一致。②中国人群中结直肠癌中PIK3CA基因的突变频率较低，PIK3CA基因突变率为7／79（8.9%），中国人群与西方人群之间PIK3CA基因突变频率存在差异。③APC，P53，K-ras和PIK3CA四组基因的突变分别与患者年龄，性别，病理分期，淋巴结转移及肿瘤浸润深度等临床病理参数进行相关性分析，均未发现具有显著性意义的相关性结果。④四组突变病例之间的相互关联分析亦不具有明显的正负相关性，提示这APC，P53，K-ras和PIK3CA4个基因的突变分别对于结直肠癌的发生发展具有推动性作用，其中任何一基因变化都可以导致结直肠癌的发生和发展。