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目的:通过钝性打击结合离心运动法建立肌筋膜疼痛综合征(Myofascial pain syndromes,MPS)大鼠模型,以激痛点为施治部位,采用大鼠疼痛行为学、电生理学、激痛点处肌组织病理形态学以及生化指标客观评价传统毫针刺、温和灸疗法对激痛点的灭活效应,探讨两种刺激手段在MPS治疗中的作用机制,为临床针灸治疗MPS提供实验依据。材料与方法:32只SPF级SD雄性大鼠适应性饲养1周后根据是否配合跑台运动分层随机分为空白组和MPS组,MPS组采用钝性打击结合离心运动法复制MPS大鼠模型。造模成功后,再按随机数字表法分为模型组、艾灸组、针刺组三个亚组。艾灸组和针刺组以激痛点位施治部位,每日治疗1次,每次15min,连续干预7d。模型组大鼠仅采取固定,不进行治疗干预。空白组大鼠正常喂养,不给予任何实验干预。观察并记录大鼠行为学变化;热刺痛仪检测大鼠热痛阈值(TWL);肌电仪检测大鼠激痛点自发电位情况;最后一次行为学检测结束后取材。采用HE染色法观察大鼠左股内侧肌激痛点处肌组织病理形态学变化;采用Elisa法检测大鼠血清IL-8和PGE2表达水平;采用免疫组化法(IHC)检测大鼠脊髓背角小胶质细胞阳性标记物OX-42表达情况;采用Western Blot法检测大鼠脊髓BDNF蛋白表达情况;采用RT-PCR技术检测大鼠脊髓OX-42基因表达情况。结果:1.大鼠一般情况:空白组大鼠皮毛干净顺滑,饮食饮水正常,活动量正常,二便正常,精神状态良好,性情温顺,两眼有神;模型组大鼠皮毛脏乱无光泽,采食减少,饮水量增加,小便增多,个别有腹泻现象肛周污秽,活动量较大,有嘶叫、打斗和攀爬鼠笼行为,精神躁动易怒,喜欢闭眼,时常将头埋于腹部;针刺组、艾灸组大鼠在治疗结束后皮毛粗糙,饮食饮水正常,活动量较少,探索行为减少,二便正常,精神状态较好,个别眼睑部分关闭。造模前,各组大鼠体质量无明显差异(P>0.05)。造模后,与空白组相比,模型组、针刺组、艾灸组体质量显著降低(P<0.01)。治疗后,与造模后相比,艾灸组、针刺组体质量增加(P<0.05或P<0.01)。2.热痛阈值变化:造模前,各组大鼠TWL差异无统计学意义(P>0.05)。造模后,模型组、针刺组、艾灸组TWL较造模前及同时点空白组显著降低(P<0.01)。治疗后,针刺组、艾灸组TWL较模型组显著升高(P<0.01);与针刺组相比,艾灸组在治疗后未见明显差异(P>0.05)。3.电生理学变化:治疗后,空白组仍无自发电活动产生;模型组10分钟内可见规律性多发的自发电活动;艾灸组和针刺组大部分鼠未出现自发电位,个别大鼠肌电图可见偶发的自发电活动,自发电位频率明显少于模型组。4.肌组织病理形态变化:横切:空白组肌组织大小均匀相等,排列整齐,细胞呈规则多边形,每个细胞边缘清晰可见位于肌膜下的细胞核。模型组肌组织大小不等,细胞变形不规则,有多个增大圆形深染的、聚集致密的挛缩结节,细胞核内移明显。艾灸组肌组织细胞较为规则,存在细胞核内移。针刺组肌组织排列紊乱,少量细胞核内移。纵切:空白组肌纤维粗细均匀,排列紧密而规律,细胞核多位于肌纤维膜下。模型组肌纤维断裂,大小粗细不等,排列紊乱,有大量炎性细胞浸润和水肿,结缔结构组织新生有粘连。艾灸组肌纤维粗细较为均匀,排列整齐,形态接近正常,少量炎性细胞浸润减轻。针刺组肌纤维粗细较为均匀,排列较为整齐有序,肌纤维断裂明显改善,纤维化粘连和炎性细胞浸润较少。5.IHC结果显示:空白组大鼠脊髓背角可见少量的小胶质细胞活化,其标记物OX-42染色呈浅棕色,胞体小且瘦长;模型组大鼠脊髓背角小胶质细胞活化数量明显增多,OX-42染色呈深棕色,胞体肥大且饱满,与空白组相比,模型组平均吸光度值显著增加(P<0.01);与模型组相比,艾灸组、针刺组小胶质细胞OX-42染色变浅,活化数量减少,平均吸光度值显著降低(P<0.01),与艾灸组相比,针刺组小胶质细胞胞体小,形态接近正常组,平均吸光度值降低(P<0.05)。6.Werstern Bolt结果显示:与空白组相比,模型组大鼠脊髓内BDNF蛋白表达量明显上调(P<0.01);与模型组相比,艾灸组、针刺组大鼠BDNF蛋白表达量明显下调(P<0.01),与艾灸组相比,针刺组大鼠BDNF蛋白表达量显著下调(P<0.01)。7.RT-PCR结果显示:与空白组相比,模型组、针刺组、艾灸组大鼠脊髓OX-42m RNA表达量均增高(P<0.05或P<0.01);与模型组相比,艾灸组、针刺组大鼠脊髓OX-42 m RNA表达量减少(P<0.05或P<0.01);与艾灸组相比,针刺组脊髓OX-42m RNA表达量减少(P<0.05)。结论:1.针刺、艾灸均能改善MPS大鼠疼痛行为,提高热痛阈值,促进肌组织炎性损伤恢复,降低激痛点处自发电活动频率,对激痛点起到灭活的作用。2.针刺、艾灸可能通过降低血清IL-8及PGE2水平,抑制脊髓小胶质细胞OX-42活化和BDNF表达,从而发挥消炎镇痛作用。艾灸较针刺在减轻炎性反应方面更佳,针刺较优于艾灸在抑制中枢敏化方面更佳。