电针足三里对慢性萎缩性胃炎大鼠肠道菌群的影响

来源 :福建中医药大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:heartless850
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目的本研究采用HE染色法、q PCR法以及16S r DNA基因测序技术相结合的方法,观察电针足三里干预慢性萎缩性胃炎大鼠的胃黏膜组织病理学、黏膜细胞增殖与凋亡、肠道菌群的变化,探讨电针足三里治疗慢性萎缩性胃炎的影响及其作用机制。方法8周龄清洁级Sprague Dawley大鼠,雌雄各半,40只,采用随机数字表法分为2组,正常组10只,造模组30只。造模期间,正常组不予任何处理,造模组大鼠每日予20mmol/L脱氧胆酸钠溶液和0.1%氨水溶液交替饮用进行化学诱导,配合2d足食、1d禁食的饥饱失常法,每日夹尾刺激1h,造模10周。以一般情况变化及胃黏膜组织病理形态作为模型评价标准。造模结束后,将成模大鼠随机分为CAG模型组、电针组和维酶素组,每组10只;电针组予以电针足三里干预,30min/次,1日1次,维酶素组予浓度为24mg/m L的维酶素混悬液灌胃,干预4周。采用苏木素-伊红(HE)染色观察胃黏膜组织病理形态;实时荧光定量PCR法(q PCR)检测胃黏膜组织中p53、Bcl-2、c-myc基因的表达水平;16S r DNA测序技术检测粪便样本菌群的结构变化和相对丰度表达。结果1.胃黏膜组织外观及病理形态结果:正常组大鼠胃黏膜组织表面光滑,黏膜皱襞完整且厚薄适度,黏膜颜色红润,富有弹性等表现;光镜下可见胃黏膜腺体结构完整,排列整齐紧密,细胞间质无出血,无炎症细胞浸润。CAG模型组大鼠胃黏膜组织可见黏膜层变薄,黏膜皱襞减少变平,组织缺乏弹性,黏膜颜色较苍白;光镜下见黏膜层萎缩,腺体层次减少,主、壁细胞大量丢失,腺腔体积增宽,大量淋巴细胞和浆细胞浸润,部分可见嗜中性粒细胞,间质内出血明显。电针组大鼠胃黏膜组织大体观可见表面光滑,皱襞稍浅,弹性稍差,黏膜无缺血、出血或溃疡改变;光镜下,胃黏膜组织固有腺体萎缩一定程度改善,细胞排列较整齐,主、壁细胞增加,腺腔体积减小,少量淋巴细胞和浆细胞浸润,偶见嗜中性粒细胞,间质内少量红细胞。维酶素组大鼠胃黏膜组织大体观可见表面欠光滑,皱襞稍浅,弹性稍差,黏膜无缺血、出血或溃疡改变;光镜下见胃黏膜组织固有腺体萎缩较CAG模型组稍改善,细胞排列较整齐,主、壁细胞增加,腺腔体积仍较大,炎性细胞浸润减少,细胞间隙仍可见充血水肿。2.胃黏膜q PCR检测结果:与正常组相比,CAG模型组的p53、c-myc基因的表达显著上升(P<0.05),而Bcl-2基因的表达显著降低(P<0.05);与CAG模型组比较,电针组的p53、c-myc基因的表达量明显下降(P<0.05),而Bcl-2基因的表达明显上升(P<0.05)。与CAG模型组比较,维酶素组的p53基因的表达量降低,Bcl-2基因的表达呈上升趋势,但差异无统计学意义(P>0.05),c-myc基因的表达明显下降(P<0.05)。与维酶素组比较,电针组的p53基因、Bcl-2基因和c-myc基因的表达量均无显著性差异(P>0.05)。3.16S r DNA基因测序结果:经造模后,各组大鼠肠道优势菌群在门、科、属分类水平的比重均发生了一定程度的变化,群落分布和肠道微生物的结构组成产生了一定程度的差异。LEf Se分析结果显示,与正常组比较,CAG模型组乳酸杆菌、脱硫弧菌、嗜果胶拟杆菌等细菌丰度上升(P<0.05),而胃气单胞菌、罗姆布茨菌、布劳特氏菌等细菌丰度下降;与CAG模型组比较,电针组的脱硫弧菌、螺杆菌的相对丰度显著降低(P<0.05),而颤螺旋菌、罗姆布茨菌、克里斯藤森菌等益生菌的相对丰度增加(P<0.05);与CAG模型组比较,维酶素组的脱硫弧菌、螺杆菌的相对丰度降低(P<0.05),而拟杆菌、普雷沃氏菌及双歧杆菌等益生菌的相对丰度升高(P<0.05)。结论1.电针足三里穴可促进慢性萎缩性胃炎大鼠胃黏膜病理损伤修复,减轻炎症细胞浸润。2.电针足三里穴能够调节胃黏膜p53、Bcl-2和c-myc基因表达,抑制胃黏膜上皮细胞的过度凋亡和异常增殖。3.电针足三里穴对肠道菌群调节产生积极作用,降低有害菌的相对丰度,提高肠道益生菌的相对丰度。
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