糖尿病性溃疡是糖尿病患者最严重的并发症之一,其病因复杂且病程持续时间长。本研究考察了植物源重组oleosin-hEGF油体微凝胶乳液（OBEME）对糖尿病大鼠溃疡创面的治疗作用。实验室前期已成功制备了可以在体外稳定存在的植物源重组oleosin-hEGF油体微凝胶乳液OBEME。为了探究OBEME对糖尿病溃疡的治疗作用,本研究利用高脂高糖喂养大鼠结合链脲佐菌素（STZ）诱导的方法构建了糖尿病大鼠模型,经大肠杆菌ATCC25922进行感染处理得到了糖尿病大鼠溃疡模型;以此实验动物模型为基础,探究OBEME经皮给药后加快糖尿病溃疡愈合的作用,初步解析OBEME加速溃疡创面愈合的作用机制。主要研究结果如下:1.本研究建立了糖尿病大鼠溃疡模型,考察OBEME经皮给药处理23 d对大鼠溃疡创面愈合的影响。持续给药处理23 d,经OBEME处理后大鼠的创面愈合率始终显著高于空白对照组与阴性对照组;H＆E染色结果也发现OBEME处理可以更有效减少炎症细胞的浸润,胶原纤维和皮肤附件形成时间早于对照组,由此说明OBEME可以加速糖尿病大鼠溃疡创面的愈合。2.本研究利用免疫组化法,免疫荧光法与Western-Blot检测分析了糖尿病大鼠溃疡创面炎性介质,增殖分化相关蛋白的表达水平,观察了溃疡创面组织胶原间隙变化趋势。结果表明,OBEME处理可以显著下调促炎因子IL-6和巨噬细胞标志物CD 68的表达,且纤维连接蛋白（FN）与结缔组织生长因子（CTGF）的表达始终高于其他各组,但基质金属蛋白酶9的表达量明显降低。通过H＆E染色观察与免疫荧光实验进一步评估OBEME促上皮化的能力发现,OBEME促进创面边缘肉芽组织生长,OBEME处理基底层标志物K 14和角质形成细胞分化标志物K 10的表达量均显著提高。由此说明OBEME具有促进细胞增殖和分化,加速肉芽组织形成和表皮成熟的能力。3.本研究利用免疫荧光法观察分析糖尿病大鼠溃疡创面中血小板内皮细胞粘附分子（CD 31）和重肽神经丝蛋白（NEFH）表达水平,结果表明OBEME处理显著性上调创面CD 31和NEFH的表达,由此说明OBEME加速创面血管新生的作用与神经修复能力。4.为了探究OBEME是否通过抗氧化作用促进溃疡愈合,本研究检测了抗氧化酶与氧化蛋白的表达水平,结果表明OBEME处理后溃疡创面组织和血清中8羟基脱氧尿苷（8-o Hd G）的蛋白表达量均明显降低;糖尿病大鼠血清中晚期氧化蛋白产物（AOPP）含量也显著低于空白处理组与阴性对照组;OBEME处理后溃疡创面中NADPH氧化酶亚基的m RNA表达量与空白对照和阴性对照组相比均得到显著下调;溃疡创面与血清中血红素氧合酶1（HO-1）与还原性谷胱甘肽（GSH）的表达水平显著增加,且在11 d时达到峰值。上述结果均证明OBEME具有抗氧化作用。5.为了探究OBEME协调氧化失衡的具体机制,本研究检测了ERK/Nrf2信号通路中的关键因子,结果发现与空白处理组和阴性对照组相比,OBEME显著激活上皮生长因子受体（EGFR）,增加GTP结合蛋白单体（Ras）的表达,进而上调丝裂原活化蛋白激酶1/2（ERK1/2）的表达,激活了ERK1/2磷酸化蛋白的水平。核因子2相关因子2（Nrf2）的表达在OBEME处理后显著升高,而胞质接头蛋白1（Keap1）的表达则显著降低,NAD（P）H醌脱氢酶1（NQO1）与血红素氧合酶1（HO-1）的表达也显著增加。因此,OBEME可以激活ERK/Nrf2信号通路,保护组织免受氧化应激损伤,促进糖尿病溃疡的愈合。综上,OBEME具有良好的促进糖尿病溃疡愈合的作用,可减缓溃疡创面炎症水平,促进增殖分化,有助于血管新生与神经修复;通过ERK/Nrf2通路发挥抗氧化作用,进而加速糖尿病溃疡创面愈合。本研究结果对深入探讨OBEME促进糖尿病皮肤溃疡愈合的分子机制提供依据,为将来新药开发及指导临床应用奠定基础。