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研究目的: 检测健康成年女性外周血T细胞与不同浓度白术内酯I诱导后的MyD88+人卵巢癌SKOV-3细胞上清共培养后,T细胞亚群(CD3+CD4+、CD3+CD8+及Treg)的分布改变;探究白术内酯I是否可以下调MyD88+人卵巢癌SKOV-3细胞介导的免疫抑制作用。 研究方法: 不同浓度白术内酯I诱导MyD88+人卵巢癌SKOV-3细胞,获得培养上清后,与健康成年女性外周血分离的T细胞共培养24小时,用流式细胞仪测定T细胞亚群CD3+CD4+、CD3+CD8+及Treg百分比,并计算CD4+/ CD8+比值。 研究结果: 1、SKOV-3细胞上清处理T细胞组的CD3+CD4+表达(40.453±0.270)低于正常T细胞组(48.247±0.385),而 CD3+CD8+表达(30.233±0.258)高于正常 T细胞组(26.580±0.295),其 CD4+/CD8+比值(1.338±0.016)显著低于正常 T细胞组(1.815±0.029),且差异具有统计学意义(P<0.05);SKOV-3细胞上清处理 T细胞组的Foxp3表达(10.260±0.782)明显高于正常T细胞组(7.340±0.458),差异有统计学意义(P<0.05); 2、不同浓度白术内酯I诱导SKOV-3细胞上清处理T细胞组的CD4+/ CD8+比值,100umol/L(1.742±0.063)、50umol/L(1.434±0.032)、10umol/L(1.358±0.018)均高于SKOV-3细胞上清处理T细胞组(1.338±0.016),且白术内酯I的浓度越高,比值越高,差异有统计学意义(P<0.05);不同浓度白术内酯I诱导SKOV-3细胞上清处理T细胞组的Foxp3表达,100umol/L(2.667±0.180)、50umol/L(3.547±0.309)、10umol/L(4.573±0.191)均低于SKOV-3细胞组(10.260±0.782),且白术内酯I的浓度越高,Foxp3值越低;差异有统计学意义(P<0.05); 3、LPS诱导SKOV-3细胞上清处理T细胞组的CD3+CD8+表达(33.573±0.828)高于 SKOV-3细胞上清处理 T细胞组(30.233±0.258),而 CD3+CD4+表达(29.740±0.675)低于SKOV-3细胞上清处理T细胞组(40.453±0.270),CD4+/ CD8+值(0.890±0.028)也明显低于SKOV-3细胞上清处理T细胞组(1.338±0.016),差异有统计学意义(P<0.05);LPS诱导 SKOV-3细胞上清处理 T细胞组的 Foxp3值(10.807±0.430)高于SKOV-3细胞上清处理T细胞组(10.260±0.782),差异有统计学意义(P<0.05)。 结论: 1. MyD88+人卵巢癌SKOV-3细胞培养上清内,存在大量免疫抑制因子,其上清处理T细胞后,能够抑制 CD3+CD4+T细胞表达,相对增加CD3+CD8+T细胞表达,从而降低CD4+/CD8+比值,并促进Treg表达,使机体处于免疫抑制状态;而LPS可以促进其免疫抑制作用; 2.白术内酯 I可能通过阻断 TLR4/MyD88通路,在一定浓度范围内,以浓度依赖方式,下调MyD88+人卵巢癌SKOV-3细胞分泌的免疫抑制因子,从而促进T细胞亚群CD3+CD4+表达,增加其分布百分比,相对抑制CD3+CD8+表达,减少其分布百分比,从而升高CD4+/CD8+比值,激发机体免疫功能;抑制 Treg表达,降低其分布百分比,缓解机体免疫抑制状态,最终下调MyD88+人卵巢癌细胞介导的免疫抑制作用; 3.白术内酯I可通过阻断TLR4/MyD88通路,抑制MyD88+人卵巢癌SKOV-3细胞的免疫抑制作用,具有增强免疫、抗肿瘤等作用,有望作为免疫治疗的有效新药在临床用于治疗卵巢癌。