目的:肝内胆管癌仍是死亡率极高的一种疾病。文献证明microRNAs（miRNAs）在肝内胆管癌形成发挥重要的作用,但如何参与肝内胆管癌的发病机理仍需要进一步深入研究。方法:首先应用human microRNA microarray分析3对肝内胆管癌及癌旁组织miRNAs差异表达,并应用Taqman q PCR在18对肝内胆管癌和癌旁组织验证miRNAs芯片结果。体外和体内裸鼠皮下成瘤及原位肝内胆管癌肿瘤模型研究miR-191对胆管癌细胞增殖、凋亡、侵袭和转移等生物学功能的影响。利用生物信息学软件预测miR-191下游靶基因,并结合荧光素酶报告基因、western blot及免疫组化等实验技术体内外鉴定miR-191下游的靶基因。结果:通过分析肝内胆管癌和癌旁组织样本microRNAs差异表达谱,得到72个明显差异性表达miRNAs（Fold Change≥2,p<0.05）。经Taqman q PCR在18对肝内胆管癌组织和癌旁组织样本验证,发现miR-191在胆管癌中差异性表达比较明显,胆管癌细胞株和正常胆管上皮细胞也发现miR-191表达差异明显。Kaplan-Meier生存分析发现miR-191高表达的患者预后更差。多因素分析发现miR-191可以预测胆管癌术后患者的预后,是胆管癌患者术后总体生存和无瘤生存的独立危险因素。ROC（Receiver-operating characteristic）曲线分析发现miR-191可以预测70%胆管癌患者的预后,但是联合TNM分期可以较高敏感性和特异性预测胆管癌（77%）的预后。体内外功能实验发现,miR-191的高表达能够明显促进胆管癌细胞的增殖、侵袭和转移。通过荧光素酶报道基因等实验技术发现miR-191可与TET1 3’UTR区域相结合。Western blot和免疫组化分析发现miR-191可负性调控TET1蛋白的表达。miR-191和TET1共同转染后,TET1的高表达可减弱miR-191在胆管癌中的生物学行为,包括增殖、侵袭和转移。进一步发现TET1可以与p53转录起始点特异性结合,通过去甲基化正向调控p53的表达。结论:miR-191的高表达与胆管癌的临床指标TNM分期相关,可以预测胆管癌患者的预后,联合TNM则能更准确的预测预后。miR-191在胆管癌中高表达可以促进增殖、侵袭和转移,其主要机制是通过负性调控TET1促进胆管癌细胞的增殖、侵袭和转移。TET1与p53转录起始点区域结合,通过去甲基化正向调控p53的表达。miR-191可以作为预测胆管癌预后的分子标志物。首次揭示miR-191/TET1/p53信号通路在胆管癌发生、发展中起到重要的作用,为胆管癌的治疗提供了一种新的治疗措施。