不同饲料添加物对脊尾白虾性腺发育同步化的影响研究

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脊尾白虾(Exopalaemon carinicauda)一年多次抱卵,但存在个体发育成熟度参差不齐、性腺发育不同步的问题,因此尚未建立规模化苗种繁育技术。基于此,本研究试图通过人为促熟性腺的方式使得脊尾白虾的性腺同步发育,以减少人力与财力的消耗,在结合了大量同类型的研究后,本研究选择了天然藻粉裂壶藻(Schizochytrium)、紫球藻(Porphyridium cruentum)以及神经递质5-羟色胺(5-hydroxytryptamine)作为添加物,根据正交实验的方法,设计了16组饲料,各物质添加量为裂壶藻粉(0、3%、6%、9%)、紫球藻粉(0、0.5%、1%、2%)、5-羟色胺肌酸酐硫酸盐(0、0.0025%、0.005%、0.01%),将16组饲料分别投喂脊尾白虾雌性和雄性,来探究三种饲料添加物对脊尾白虾性腺发育的影响,主要的研究结果如下:(1)不同饲料添加物对脊尾白虾雌虾性腺发育的影响:以规格为(1.49±0.12)g的脊尾白虾雌虾为养殖对象,进行为期4周的养殖试验。结果显示:S7组饲料(裂壶藻粉3%、紫球藻粉2%、5-羟色胺肌酸酐硫酸盐0)饲喂的脊尾白虾雌虾特定生长率高于其他实验组,S8组饲料(裂壶藻粉6%、紫球藻粉0、5-羟色胺肌酸酐硫酸盐0.005%)喂养的条件下存活率最高,达到了96.67%;在性腺发育方面,S10组(裂壶藻粉6%、紫球藻粉1%、5-羟色胺肌酸酐硫酸盐0.0025%)的性腺指数显著高于其他实验组(P<0.05),卵巢发育率最高,达到了(79.30±2.64)%,正交分析性腺指数的结果得到的最佳饲料配比即为S10的配比。同时,S10组饲料喂养下脊尾白虾雌虾血淋巴总蛋白、甘油三酯和胆固醇浓度均为组内最高,血淋巴促性腺激素释放激素、卵巢卵黄蛋白原和雌二醇的最终含量均显著高于其他组(P<0.05)。S7组饲料(裂壶藻粉3%、紫球藻粉2%、5-羟色胺肌酸酐硫酸盐0)最有利于脊尾白虾雌虾的生长;S10组饲料(裂壶藻粉6%、紫球藻粉1%、5-羟色胺肌酸酐硫酸盐0.0025%)最有利于脊尾白虾雌虾的性腺发育。(2)不同饲料添加物对脊尾白虾雄虾性腺发育的影响:以规格为(1.36±0.20)g的脊尾白虾雄虾为养殖对象,进行为期4周的养殖试验。结果显示:S3组饲料(裂壶藻粉0、紫球藻粉2%、5-羟色胺肌酸酐硫酸盐0.0025%)饲喂的脊尾白虾雄虾特定生长率和增重率高于其他实验组,各实验组存活率无显著性差异(P>0.05);在性腺发育方面,S12组(裂壶藻粉9%、紫球藻粉0、5-羟色胺肌酸酐硫酸盐0.01%)的性腺指数高于其他实验组但并不显著(P>0.05),精子存活率各组间无显著性差异(P>0.05),正交分析性腺指数的结果得到的最佳饲料配比为(裂壶藻粉6%、紫球藻粉0、5-羟色胺肌酸酐硫酸盐0.01%),经实验验证,与S12组饲料在性腺指数方面没有显著性差异(P>0.05)。S12组饲料喂养下脊尾白虾雄虾血淋巴甘油三酯和胆固醇浓度均为组内最高,但与其他组并无显著性差异(P>0.05),精子超微量总ATP酶和乳酸脱氢酶最终活性均高于其他组(P<0.05)。S3组饲料(裂壶藻粉0、紫球藻粉2%、5-羟色胺肌酸酐硫酸盐0.0025%)最有利于脊尾白虾雄虾的生长;S12组饲料提升了精子的酶活性,最有利于脊尾白虾雄虾的性腺发育,而正交分析所得的组合实验结果与S12组并无显著性差异,出于经济效益的考虑,以下配比为促进脊尾白虾雄性性腺发育的最适选择(裂壶藻粉6%、紫球藻粉0、5-羟色胺肌酸酐硫酸盐0.01%)。(3)二十二碳六烯酸(DHA)和花生四烯酸(ARA)替代天然饲料添加物对脊尾白虾性腺发育的影响:以规格分别为(2.52±0.30)g的雌虾和(1.93±0.34)g的雄虾为养殖对象,将之前研究得到的促进脊尾白虾雌雄性腺发育的最佳饲料进行纯脂肪酸DHA和ARA的替代,进行为期4周的养殖试验。结果显示:雌雄两组间的性腺指数,卵巢发育率(精子存活率)之间均无显著性差异;雌虾血淋巴生化参数两组间有着较大差异,但A10组(裂壶藻粉6%、紫球藻粉1%、5-羟色胺肌酸酐硫酸盐0.0025%)较T10组(DHA:0.2268066%、ARA:0.0001733%、5-羟色胺肌酸酐硫酸盐0.0025%)稳定,A10组血淋巴促性腺激素释放激素和卵巢卵黄蛋白原含量在28d时显著高于T10组(P<0.05);雄虾血淋巴甘油三酯浓度两组间变化趋势相差较大,总蛋白和胆固醇浓度无显著性差异(P>0.05)且变化趋势一致,A12组饲料(裂壶藻粉6%、紫球藻粉0、5-羟色胺肌酸酐硫酸盐0.01%)饲喂的雄虾血淋巴中睾酮含量较T12组饲料(DHA:0.2268%、ARA:0.0001656%、5-羟色胺肌酸酐硫酸盐0.0025%)饲喂的高,但两组间并无显著性差异(P>0.05),A12组精子乳酸脱氢酶最终活性显著高于T12组,超微量总ATP酶活性变化较大。两组饲料对于脊尾白虾雌雄个体的肝胰腺消化酶活性的影响显著(P<0.05),但影响变化并不规律。性腺抑制激素基因GIH在脊尾白虾除精子外的各个组织中,均在纯物质组有着高表达且两组间差异显著(P<0.05)。蜕皮抑制激素基因MIH在脊尾白虾的各个组织中同样均在纯物质组有着高表达,在雌性肝胰腺和眼柄、雄性精子和眼柄中均存在显著性差异(P<0.05)。A10组饲料可以增加脊尾白虾雌性的营养与激素积累,并且显著降低了MIH和GIH基因的表达;A12组饲料可以增加脊尾白虾雄性的精子酶活,并且显著降低了MIH和GIH基因的表达(P<0.05),综合考虑饲料效果以及经济效益,最有利于脊尾白虾雌虾性腺发育的饲料配比为A10组(裂壶藻粉6%、紫球藻粉1%、5-羟色胺肌酸酐硫酸盐0.0025%);最有利于脊尾白虾雄虾性腺发育的饲料配比为A12组(裂壶藻粉6%、紫球藻粉0、5-羟色胺肌酸酐硫酸盐0.01%)。该论文有图27幅,表14个,参考文献127篇。
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