Glypican-3(磷脂酰肌醇蛋白聚糖-3,GPC3)是1996年Pilia在一例过度生长综合征(Simpson-Golabi-Behmel syndrome,SGBS)患者中克隆出来的。研究表明,GPC3是细胞生长和分化的负调控基因,正是由于GPC3的缺失突变导致了SGBS。SGBS主要表现为产前、产后胎儿过度生长,伴有多脏器和骨骼系统发育异常,以及高发性胚胎性肿瘤。近年来发现GPC3与多种恶性肿瘤密切相关,GPC3不仅作为一种癌胚抗原在恶性肿瘤的诊断中发挥作用,同时在恶性肿瘤的发生、发展中也起着重要的调控作用。鉴于GPC3的功能学特点,推测可能由于GPC3的异常表达导致了局部组织细胞在分子水平上失掉了对其生长的正常调控,从而恶性增殖引起了肿瘤的发生。 为了探讨GPC3与卵巢癌的关系,本课题的第一部分研究了GPC3基因及蛋白在卵巢癌中的表达情况并分析了其临床意义。首先利用实时荧光定量RT-PCR检测了GPC3mRNA在25例卵巢癌组织、23例正常卵巢组织中的表达。结果发现,GPC3mRNA在卵巢癌组织中的表达量低于正常卵巢组织,在部分卵巢癌组织中完全不表达,并且在晚期卵巢癌组织中的表达量低于早期。GPC3可能不仅与卵巢癌的发生有关,并且参与了卵巢癌的病程进展。其次利用Western blot对GPC3蛋白在卵巢癌组织和正常卵巢组织中的表达情况进行了分析。结果表明,GPC3蛋白在卵巢癌组织中的表达量同样低于正常卵巢组织。 表达水平的检测是研究基因及其编码的蛋白在恶性肿瘤中作用的第一步,只有加深对其生物学功能的认识,才能有助于明确其在肿瘤发生中的作用机制。GPC3的主要功能是调控细胞的生长和分化,然而对于GPC3是否在卵巢中同样发挥着上述作用,目前尚不清楚。为了探讨GPC3在卵巢中的生物学功能,本课题的第二部分利用激光捕获显微切割技术(LCM),切割了15例大鼠卵巢组织的初级卵泡和次级卵泡,并且结合实时荧光定量RT-PCR检测了GPC3在其中的表达情况。结果显示,GPC3不仅表达于初级卵泡和次级卵泡中,并且在次级卵泡中的表达量高于初级卵泡,提示GPC3可能在初级卵泡到次级卵泡的生