【摘 要】
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鸭疫里默氏杆菌是危害我国养鸭业的重要致病菌之一,常引起以纤维素心包炎、脑膜炎为症状的感染。前期研究表明,鸭疫里默氏杆菌ATCC 11845(RAATCC 11845)株编码三个ton B基因,即
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鸭疫里默氏杆菌是危害我国养鸭业的重要致病菌之一,常引起以纤维素心包炎、脑膜炎为症状的感染。前期研究表明,鸭疫里默氏杆菌ATCC 11845(RAATCC 11845)株编码三个ton B基因,即ton B1、ton B2、tbf A(ton B3)。ton B1和ton B2参铁和血红素的利用;而tbf A并未参与。本研究针对三个ton B基因的转录调控及代偿展开研究。主要研究结果如下:1.鸭疫里默氏杆菌ton B基因簇的鉴定序列分析表明,鸭疫里默氏杆菌有三个ton B基因簇,用RT-PCR扩增相邻基因的间隔序列。结果表明,RA0C1180-ton B1-exb B1-exb D1-RA0C1194,ton B2-exb B2-exb D21-exb D22均是共转录的,而tbf A与相邻基因不是共转录。2.鸭疫里默氏杆菌ton B基因的转录调控情况荧光定量PCR检测鸭疫里默氏杆菌ton B基因在TSB培养条件下的转录水平。结果表明,在TSB培养条件下ton B2转录水平最高,ton B1次之,tbf A的转录水平最低;在铁限制或血红素限制条件下,RAATCC 11845的3个ton B基因的转录没有显著差异,表明ton B基因不受铁离子或者血红素的调控;在37°C和42°C培养条件下的转录水平,ton B1、ton B2基因的转录水平均没有明显变化,而tbf A基因在42°C条件下的转录水平是37°C条件下的2倍。3.鸭疫里默氏杆菌ton B基因的功能分析在TSB培养条件下,RAATCC 11845缺失任意一个ton B基因后,其余两个ton B基因的转录水平并未发生改变,表明三个基因之间在普通培养条件下不存在代偿性表达。对ton B基因缺失株进行了回补后进行生长实验,结果表明ton B1与ton B2基因不能互相替代,tbf A不能替代ton B1的功能,而tbf A能代偿ton B2的功能。RAATCC 11845野生株、ton B1或ton B2基因缺失株及回补株,分别用链黑霉素和过氧化氢处理。结果表明,野生株和回补株对链黑霉素和过氧化氢的抵抗能力较弱,而缺失株的抵抗力明显增加,间接表明,ton B1、ton B2基因缺失后,细菌胞内铁离子含量降低;相反,tbf A基因缺失株对链黑霉素和过氧化氢抵抗能力影响不明显。
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