研究背景:急性肺损伤（Acute lung injury,ALI）是一种常见的,高发病率、高死亡率的严重炎症性疾病。ALI的主要病理改变为弥漫性的肺间质及肺泡水肿,为非均一性的渗出性改变,由此使肺部发生顺应性减低、肺容积减少以及通气/血流比例失调等病理生理特征改变;而其主要的临床表现为进行性的呼吸窘迫和低氧血症。近年来,针对ALI的新的治疗手段不断涌现,众多研究者以抑制炎症反应,控制炎症风暴为手段开展研究。此外,以miRNAs和circRNAs为靶点,从分子层面控制ALI疾病的发生和发展也备受关注。肺泡上皮细胞产生的胸腺基质淋巴细胞生成素（thymic stromal lymphopoietin,TSLP）已被证明通过引发气道炎症而加重ALI。然而,TSLP表达的调控机制尚不清楚。因此,寻找TSLP上游的miRNAs和circRNAs并进一步靶向干预,可能是ALI治疗新的研究发现。目的:探究潜在的miRNA和circRNA在调控脂多糖（LPS）诱导的ALI中的TSLP的作用。方法:通过在线数据库TargetScan数据库,预测TSLP的潜在miRNAs。TargetScan是一种预测哺乳动物miRNA靶基因的在线算法。并且,在数据库中可直接下载TSLP 3’UTR上miR-291a-3p的结合位点信息,以此可以确定相应的突变结合位点序列。进一步,使用StarBase数据库预测miR-291a-3p的潜在环状RNA。利用荧光定量PCR检测潜在miRNA、mRNA及环状RNA变化。收集肺组织、细胞样品,裂解后,利用蛋白免疫印迹实验检测TLSP等相关蛋白变化。收集肺组织标本,用多聚赖氨酸固定后,利用苏木精-伊红染色,检测肺组织病理损伤程度。提取细胞RNA,利用RNA下拉实验检测RNA相互作用情况。进一步利用荧光原位杂交技术检测细胞内RNA位置变化。同时,构建表达载体,利用双荧光素酶报告基因实验,检测miRNA与mRNA的相互作用。最后,合成反义寡核苷酸,在LPS诱导的ALI小鼠模型中,通过尾静脉注射用于circNCLN或对照的ASO,检测相关指标。结果:1.在LPS诱导的ALI小鼠肺中,miR-291a-3p显著降低。2.双荧光素酶报告基因实验数据显示,miR-291a-3p可与胸腺基质淋巴细胞生成素（TSLP）结合。3.数据库检索显示:circNCLN与miR-291a-3p高度相关,且存在于肺上皮细胞中。4.在MLE-12细胞中,敲低circNCLN并抑制miR-291a-3p,可恢复ALI病理中TSLP蛋白的表达。5.给LPS诱导的ALI小鼠模型,注射circNCLN ASO后,可缓解ALI的病理变化。结论:circNCLN/miR-291a-3p/TSLP轴可能是LPS诱导的ALI的重要信号转导通路,而靶向circNCL抑制可能作为ALI的潜在治疗方法。