【摘 要】
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目的:探讨醌氧化还原酶1(NQO1)基因mRNA和蛋白在甲基苯丙胺(METH)依赖人群的病理生理作用,NQO1 609 C/T(rs1800566)多态性等位基因和基因型与METH依赖者相关性及其影响因素,分析NQO1609C/T基因型是否影响NQO1基因的转录和翻译水平变化,为METH依赖的预防和治疗提供分子生物学依据。方法:收集392例中国汉族METH依赖者(实验组)和669例中国汉族无MET
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目的:探讨醌氧化还原酶1(NQO1)基因mRNA和蛋白在甲基苯丙胺(METH)依赖人群的病理生理作用,NQO1 609 C/T(rs1800566)多态性等位基因和基因型与METH依赖者相关性及其影响因素,分析NQO1609C/T基因型是否影响NQO1基因的转录和翻译水平变化,为METH依赖的预防和治疗提供分子生物学依据。方法:收集392例中国汉族METH依赖者(实验组)和669例中国汉族无METH依赖的健康体检者(对照组)的人口学特征、实验室检查资料及外周血样;实时荧光定量聚合酶链反应(qPCR)检测NQO1 mRNA在PBMCs的相对表达量,酶联免疫吸附试验(ELISA)检测血浆蛋白的表达水平,NQO1 609C/T多态性采用限制片段长度多态性聚合酶链反应(RFLP-PCR)和直接测序基因分型技术进行检测。利用SPSS13.0统计软件对所得的实验数据进行统计分析,以P<0.05为检验有统计学差异。结果:实验组在年龄、性别、红细胞计数和收缩压与对照者均没有统计学差异(P>0.05);实验组身体质量指数(BMI)20.44±5.14 kg/m~2明显低于对照组BMI 22.19±3.13kg/m~2(P<0.01);实验组的白细胞计数、血红蛋白量和舒张压均显著高于对照组(P<0.01)。NQO1 mRNA实验组的相对表达量3.2650±2.2943明显高于对照组相对表达量1.0125±0.7959(P<0.001),NQO1血浆蛋白在实验组表达水平0.2368±0.1486显著低于对照组表达水平0.5844±0.1742(P<0.001)。392例实验组和669例对照组完成NQO1 609C/T等位基因和基因型分型,NQO1 609C/T多态性基因型频率在对照组人群具有较好的代表性(基因型频率分布符合HWE,P=0.06)。实验组NQO1 609C/T多态性T等位基因频率46.56%明显高于对照组T等位基因频率41.78%(P=0.032,OR=1.214,95%CI=1.017-1.450)。实验组NQO1 609C/T多态性CC、CT、TT基因型频率分别为24.49%、57.91%和17.60%,对照组CC、CT、TT基因型频率分别为32.14%、52.17%和15.69%;在同质遗传模式(TT vs CC)、异质遗传模式(TC vs CC)、显性遗传模式(TC+TT vs CC)和隐性遗传模式(TT vs TC+CC)分析NQO1 609C/T多态性基因型与METH依赖人群的风险关系发现在异质遗传模式和显性遗传模式下差异均有统计学意义(TC vs CC:P=0.012,OR=1.457,95%CI=1.087-1.952;TC+TT vs CC:P=0.008,OR=1.460,95%CI=1.102-1.935),在同质遗传模式和隐性遗传模式下差异无统计学差异(TT vs CC:P=0.051,OR=1.472,95%CI=0.999-2.168;TT vs TC+CC:P=0.418,OR=1.147,95%CI=0.822-1.601)。多因素Logistic回归分析调整年龄和性别后,仍得到类似结果。实验组按照同质遗传模式和异质遗传模式对年龄、性别、BMI、血压和血常规进行分层分析发现NQO1 609C/T多态性基因型无论在同质遗传模式或异质遗传模式下均无统计学意义。NQO1 609C/T多态性的功能评价采用对照组基因型与其mRNA和蛋白是否存在统计学差异进行评价,结果表明NQO1 609C/T多态性CT、TT和CT/TT基因型与NQO1 mRNA和血浆蛋白无统计学差异(P>0.05);实验组也得出类似结果。结论:(1)METH依赖可能引起人体身体素质和生理生化指标的改变;(2)NQO1基因mRNA和蛋白在METH依赖的病理生理过程中起着重要的作用;(3)NQO1 609C/T多态性可能与中国汉族METH依赖人群的遗传易感性有关,并不受年龄、性别、BMI、血压和炎症状态等因素影响;(4)NQO1 609C/T多态性可能不引起NQO1转录和翻译水平的变化。
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