透明质酸(HA)是一种广泛存在于人和动物体各组织中的酸性粘多糖,具有重要的生理功能,已被广泛的应用于医药及化妆品等领域。目前我国医用级HA的生产主要是通过组织提取法获得,其产量已不能满足市场对HA需求的日益增长,而生物发酵法生产药用级透明质酸,具有不受原料资源限制、生产成本低、质量易控制等特点,具有重要的社会意义和经济价值。因此开发一套完整的利用微生物发酵生产HA的发酵和分离纯化工艺就非常有必要。本项研究目的在于研究出一条利用微生物发酵法生产HA,并对其进行分离纯化,以达到医用级HA质量标准的工艺路线及其技术参数。采用马链球菌兽瘟亚种Streptococcus zooepidemicus进行一次性补料式发酵培养,分别对发酵条件、发酵液预处理、分离纯化等工艺条件进行研究,通过检测HA发酵产量、收率、特性粘度和蛋白去除率等指标,选择最佳的发酵和提取工艺,通过检验,得到的HA产品为白色纤维,HA发酵产量为5.7～6.2 g/L,纯化小试收率约60%,特性粘度1800～2200 cm3/g,蛋白含量低于0.1%,葡萄糖醛酸含量为46.4%,内毒素小于0.5 EU/mg,无菌检验合格,经过红外、紫外光谱分析,与对照品基本一致,达到医用级HA的标准。结论:研究获得了一套完整的利用微生物发酵法生产医用级HA的发酵及纯化工艺路线和技术参数,对实现医用级HA的产业化生产具有实际意义。