白藜芦醇对砀山酥梨黑皮病控制效果与发病机理的研究

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黑皮病是梨在贮藏中后期发生的一种严重的生理性病害,大大降低了果实的商品价值。本研究以杨山酥梨(Pyrus bretscneideri Rehdcv,Danshansuli)为实验材料,选用天然抗氧化剂白藜芦醇(Res)进行处理,对比其与1-甲基环丙烯(1-MCP)和二苯胺(DPA)处理对砀山酥梨黑皮病的防治,研究了果实冷藏期间α-法尼烯代谢和抗氧化能力对黑皮病的影响,并且从分子的角度研究了梨α-法尼烯合成酶(PFS)和多酚氧化酶(PPO)的基因表达对黑皮病的影响,进一步揭示白藜芦醇能够控制黑皮病的可能机理。实验结果如下:1.白黎芦醇处理能够显著控制砀山酥梨黑皮病的发生。冷藏210天时,CK组的果实黑皮病发病率为18.2%,病情指数为8.2%,而Res、1-MCP和DPA处理的果均无发病。之后25℃下货架期10天对比发现,10天后CK组发病率迅速增至91.5%,而Res、1-MCP和DPA处理组分别为26.2%、12.0%和30.0%,病情指数分别为75.3%、11.1%、9.0%和13.0%,说明Res显著地控制了砀山酥梨黑皮病的发生,并且处理效果与DPA效果相当。2.在整个冷藏期间砀山酥梨果皮中α-法尼烯含量呈先上升后下降的趋势。冷藏120天时CK组果皮中α-法尼烯含量达到峰值(27.2 nmol·cm-2),而白藜芦醇处理推迟至150天时出现峰值(25.3 nmol·cm-2)。与此同时,通过对果皮中PFS的相对表达量的研究发现其变化趋势和α-法尼烯含量变化类似,1-MCP显著抑制了 PFS基因的表达,Res处理推迟并降低了 PFS基因表达的峰值,由此推断,推迟并降低PFS基因表达来减少α-法尼烯的含量是Res控制黑皮病的原因之一。3.砀山酥梨冷藏期间共轭三烯的含量一直增加。从结果可以看出,贮藏至210天时DPA处理组和Res处理组的共轭三烯的含量显著低于1-MCP处理组和CK组。前两者之间差异不显著,由此推测,抑制α-法尼烯向共轭三烯的转换是Res控制黑皮病的原因之一。4.砀山酥梨在冷藏期间总酚的含量不断的增加,PPO活性在第120天达到高峰,之后开始下降,在第210天时达到最大值,其中对照组(7.4 U·g-1FW·min-1),显著高于其它各处理组。Res、1-MCP和DPA处理均能有效的减少总酚含量并且抑制PPO活性,Res处理组的PPO活性最低(5.8 U·g-1FW·min-1)。本实验通过对PPO基因表达的研究发现,1-MCP处理组PPO基因表达一直最低,Res和DPA处理差异不显著,认为Res能够抑制PPO基因表达进而降低PPO活性,从而防止了果皮褐变减少了黑皮病的发生。5.砀山酥梨果皮中O2-·产生速率和H202的含量随着冷藏天数的增加而不断增加,CK组显著高于各处理组;而抗氧化酶SOD、CAT、POD的活性也随之变化,在第90天时SOD、CAT、POD活性达到一个高峰,并且在整个冷藏期CK组的酶活显著低于各处理组。由此推断,各处理组通过提高果皮中抗氧化酶活性,降低活性氧自由基的产生来减少黑皮病的发生。并且发现1-MCP处理效果最好,Res和DPA效果相当。
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