【摘 要】
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目的:研究紫檀芪（Pterostilbene,Pts）对哮喘模型小鼠氧化应激和气道炎症反应的药理作用及其作用机制。方法:体内实验:1.观察Pts（25,50μM）对哮喘小鼠肺组织的病理学影响。2.用Diff-Quik染色法分类计数炎性细胞的数量。3.用ELISA法检测（BALF中）细胞因子的含量。4.利用乙酰胆碱（acetylcholine chloride,Ach）呼吸激发实验检测小鼠气道反应性
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目的:研究紫檀芪（Pterostilbene,Pts）对哮喘模型小鼠氧化应激和气道炎症反应的药理作用及其作用机制。方法:体内实验:1.观察Pts（25,50μM）对哮喘小鼠肺组织的病理学影响。2.用Diff-Quik染色法分类计数炎性细胞的数量。3.用ELISA法检测（BALF中）细胞因子的含量。4.利用乙酰胆碱（acetylcholine chloride,Ach）呼吸激发实验检测小鼠气道反应性。5.用酶标仪检测小鼠的血清中的SOD、CAT活性,及MDA的含量。6.Western blot法检测AMPK、Sirt1、HO-1的表达。7.组织免疫化学检测p-AMPK、Nrf2、HO-1的表达。8.组织免疫荧光检测p-AMPK的表达。体外实验:1.16HBE细胞产生的炎症反应是用LPS刺激的。用MTT法设置不同的浓度的Pts（15,30μM）测16HBE的细胞活力。2.用ELISA法检测（16HBE细胞中）细胞因子。3.用Griess法检测NO含量。4.流式细胞仪检测ROS表达。5.Western blot法检测i NOS、COX-2、AMPK、p-AMPK、Nrf2、HO-1的表达。6.组织免疫荧光检测ROS、p-AMPK的表达。结果:体内实验结果:1.Pts能明显抑制哮喘小鼠肺气道内炎症细胞的浸润及杯状细胞增生、粘液分泌（P<0.05）;2.Pts治疗组使哮喘小鼠BALF中炎症细胞数量呈剂量依赖性下降,Pts能够使OVA诱导炎症反应中的炎症细胞减少（P<0.05）;3.Pts显著降低哮喘模型BALF中IL-4、IL-5、IL-13、总Ig E、OVA特异性Ig E的水平,但对于IFN-γ的表达水平作用相反（P<0.05）;4.Pts降低了AHR（P<0.05）;5.Pts有助于提升SOD和CAT的活性,但对于提高MDA的表达含量有消极作用（P<0.05）,Pts降低OVA引起哮喘小鼠氧化应激水平;6.Pts促进了p-AMPK、Sirt1、Nrf2和HO-1蛋白的水平表达（P<0.05）。体外实验结果:1.Pts的用药浓度对16HBE细胞活性是没有影响的;2.Pts可抑制16HBE细胞TNF-α、IL-1β、IL-6的表达（P<0.05）,对缓减16HBE细胞中的炎症反应有利;3.Pts抑制NO、PGE2、i NOS和COX-2的表达（P<0.05）;4.Pts能够使16HBE细胞ROS表达水平降低,不利于氧化应激的发生,从而增强抗氧化的能力;5.Pts有利于p-AMPK、Sirt1、Nrf2和HO-1的表达（P<0.05）。结论:1.紫檀芪可能通过调节Th1/Th2免疫失衡来缓解哮喘气道炎症反应;2.紫檀芪可能通过激活AMPK/Sirt1/Nrf2/HO-1信号通路,减轻哮喘模型小鼠氧化应激和气道炎症反应。
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