白花蛛毛苣苔中不同极性部位及苯乙醇苷类化合物对H2O2诱导PC12细胞神经损伤保护作用研究

来源 :内蒙古科技大学包头医学院 | 被引量 : 0次 | 上传用户:qwer2
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目的研究白花蛛毛苣苔不同极性部位及苯乙醇苷类化合物对H2O2诱导PC12细胞氧化损伤的保护作用及其对Nrf2/ARE信号通路下游基因HO-1和GCLC表达的影响。方法对白花蛛毛苣苔各极性部位及3个苯乙醇苷类化合物进行制备,利用H2O2诱导PC12细胞建立氧化应激损伤模型,Real-time Cell Analysis(RTCA)多功能实时细胞功能分析技术监测细胞指数值(cell index,CI),检测白花蛛毛苣苔对H2O2诱导PC12细胞氧化损伤的保护作用;生化法测定各组细胞的超氧化物歧化酶(SOD)和乳酸脱氢酶(LDH)活性的改变;采用实时荧光定量PCR(real-time PCR)法检测其对核因子相关因子2(nuclear factor-E2-related factor 2,Nrf2)调控基因血红素氧合酶-1(HO-1)、谷氨酰半胱氨酸连接酶催化亚基(GCLC)m RNA表达的影响。结果(1)不同浓度白花蛛毛苣苔正丁醇部位及其单体化合物Caleolarioside B、Paraboside B和Glutinoside B能够保护H2O2诱导PC12细胞的氧化损伤,其中Caleolarioside B的保护作用在3.125μmol·L-1-50μmol·L-1浓度范围内呈一定剂量依赖性,浓度为50μmol·L-1时,对H2O2诱导PC12细胞氧化损伤的保护作用最强;而Paraboside B和Glutinoside B抗氧化损伤的保护作用在3.125μmol·L-1-50μmol·L-1浓度范围内不具有剂量依赖性,其中浓度均为12.5μmol·L-1时,对H2O2诱导PC12细胞损伤的保护作用最强。(2)Caleolarioside B、Paraboside B和Glutinoside B均可提高H2O2损伤后的PC12细胞内SOD活力,降低LDH活性。(3)Caleolarioside B、Paraboside B和Glutinoside B均可明显激活Nrf2下游HO-1基因的表达,表达量为空白对照组的1.5-6倍;3.125μmol·L-1和50μmol·L-1Caleolarioside B可激活下游GCLC基因的表达,表达量为空白对照组的1.5倍左右,而Paraboside B和Glutinoside B对GCLC m RNA的表达无影响。结论白花蛛毛苣苔正丁醇部位及其单体化合物Caleolarioside B、Paraboside B和Glutinoside B对H2O2诱导PC12细胞氧化损伤具有保护作用,其单体化合物的作用机制可能是通过激活Nrf2/ARE抗氧化信号通路来实现。
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