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目的:通过回顾研究建立肝纤维化动物模型,观察紫七软肝片对实验性大鼠肝纤维化形成过程中早晚期的干预作用及对转化生长因子β1(TGF-β1)和内毒素(ET)表达的影响,探讨清化瘀毒法抗肝纤维化可能机制及两种不同治则方剂对肝纤维化影响的差异。
方法:大鼠随机分为空白对照组(K),模型组(M)、紫七软肝片组(Z)、大黄庶虫虫丸组(D)和秋水仙碱组(Q),模型组及所有给药干预组大鼠给予40%CCl4皮下注射,3ml/kg体重,首次剂量5ml/kg体重,每隔三天一次,连续6周;同时给予高脂饲料及酒精喂养,建立肝纤维化模型。造模的同时灌胃给药干预,紫七软肝片组给予大鼠3g/kg·d剂量,大黄庶虫虫丸组给予0.9g/kg·d剂量,秋水仙碱组给予0.1mg/kg·d剂量,肝纤维化模型组给予等容量的生理盐水灌胃,10ml/kg·d;共6周。实验第4周及6周末,处死半数大鼠各取血清、肝组织,经HE及VG染色观察肝组织炎症活动度和肝纤维化程度,酶联免疫分析法检测肝组织中TGF-β1和血清中ET的含量。
结果:①肝纤维化模型组大鼠肝组织炎症活动度计分及肝纤维化程度计分均较空白对照组明显升高,差异有显著意义(P<0.01);药物干预后炎症活动度计分及肝纤维化程度计分均较模型组降低,其中紫七软肝片组6周末时炎症活动度计分最低(P<0.05),且肝纤维化度计分与模型组有显著差异(P<0.01);紫七软肝片组肝纤维化程度计分较秋水仙碱组有显著差异(P<0.05)。②紫七软肝片组在降低HA、PcIII、Hyp较模型组有显著差异(P<0.01)。③肝纤维化模型组大鼠肝组织TGF-β1及血清E T表达均较空白对照对照组升高,TGF-β1差异有显著性意义(P<0.01);应用紫七软肝片、大黄庶虫虫丸和秋水仙碱干预后,大鼠肝组织TGF-β1表达均较模型组明显降低(P<0.01,P<0.05,P<0.05),紫七软肝片组6周末时血清E T的表达与模型组有显著差异(P<0.05)。
结论:①紫七软肝片能够减轻大鼠肝组织炎症活动度及纤维化程度。②肝纤维化大鼠肝组织TGF-β1和血清E T表达增加,TGF-β1与肝纤维化的发生发展关系密切。③以清化瘀毒为旨立法的紫七软肝片能够降低大鼠肝纤维化形成中血清HA、PcIII、ET及肝组织TGF-β1,尤其以肝纤维化早期明显,可能是紫七软肝片抗肝纤维化的作用途径之一;④紫七软肝片对肝纤维化早期的干预作用明显,优于秋水仙碱;有清化瘀毒法功效的紫七软肝片对肝纤维化形成的干预作用略优于有活血化瘀散结、缓中补虚功效的大黄庶虫虫丸。