【摘 要】
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目的：观察胆固醇过负荷对脂肪细胞分泌内脂素的影响,并初步探讨其机制。方法：培养3T3-L1脂肪细胞,促分化成熟后,光镜下观察细胞形态的变化,油红O染色鉴定脂肪细胞。分别以酯酰
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目的：观察胆固醇过负荷对脂肪细胞分泌内脂素的影响,并初步探讨其机制。方法：培养3T3-L1脂肪细胞,促分化成熟后,光镜下观察细胞形态的变化,油红O染色鉴定脂肪细胞。分别以酯酰辅酶A胆固醇脂酰转移酶(ACAT)抑制剂(2u1)和不同浓度(0、25、50、75和100ug/m1)的氧化型低密度脂蛋白(ox-LDL)干预48小时,以ACAT抑制剂(2u1)和相同浓度(50ug/m1)的ox-LDL干预0、6、18、36和48小时,以ACAT抑制剂(2u1)、ox-LDL(50ug/m1)和不同浓度(0、100、200和400uM)的牛磺酸熊去氧胆酸(TUDCA)干预48小时。用ELISA法检测细胞上清脂肪细胞因子内脂素的表达,Western Blot法检测脂肪细胞总蛋白GRP78和CHOP表达。结果：1.ACAT抑制剂和不同浓度的ox-LDL干预脂肪细胞48小时后,随着ox-LDL浓度的增加,脂肪细胞内胆固醇浓度显著递增。与对照组(ox-LDL Oug/ml)比较,各干预组细胞内胆固醇浓度均明显增加,差异均具有统计学意义(P均<0.05)。2. ACAT抑制剂和不同浓度的ox-LDL干预脂肪细胞48小时后,随着ox-LDL浓度的增加,GRP78、CHOP蛋白表达及内脂素水平显著升高,与对照组(ox-LDL Oug/ml)比较,差异均具有统计学差异(P均<0.05)。3. ACAT抑制剂和ox-LDL干预不同时间后,随干预时间的延长,脂肪细胞GRP78、CHOP蛋白表达及内脂素水平均显著升高,与对照组(0小时)比较,差异均有统计学差异(P均<0.05)4. ACAT抑制剂、ox-LDL和不同浓度TUDCA干预48小时后,脂肪细胞GRP78及CHOP蛋白表达水平及内脂素水平逐渐降低,与OuM组(对照组)比较,均有统计学差异(P均<0.05)。结论：1.用ACAT抑制剂和ox-LDL干预后可使脂肪细胞内的胆固醇负荷增加。2.胆固醇过负荷可促进脂肪细胞分泌内脂素,且随着胆固醇负荷量或时间的增加,脂肪细胞分泌内脂素的量也明显递增。3.胆固醇过负荷促进脂肪细胞分泌内脂素可能与其增强细胞内质网应激有关。
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