IGF-I介导的mTOR/PKB信号通路在调控骨骼肌出生后的肥大发育中发挥着重要作用,而CaN/NFATc1信号通路可以调控出生后肌纤维类型转化,促进快肌纤维向慢肌纤维转化,从而提高了氧化型纤维的比例并促使猪肉品质更加优良。本研究以实验室前期应用基因芯片技术在四月龄中外猪种(大白猪、梅山猪)背最长肌中鉴定的差异表达基因信息为基础,着重考虑其在生后骨骼肌发育中的生理功能及在上述通路中的作用,一方面从IGF-I-mTOR/PKB和CaN/NFATc1两个信号通路中分别选取了8个、6个功能基因进行分离鉴定、时空表达分析研究;另一方面对CaN/NFATc1信号通路调控的靶基因:MYH1、MYH2、MYH4的5′侧翼序列进行了分离、AT2元件序列的扩增、结构突变的遗传效应分析等研究,为从肌肉生长发育改良肉质提供理论依据。主要研究结果如下:1、分离了GRB2基因(GenBank:FJ196595)完整的CDS序列和PDK1(GenBank:FJ196594)、MEF2D(GenBank:EU878304)、FKBP5基因部分编码区序列。用生物信息学方法推导了猪GRB2基因的氨基酸序列,发现GRB2基因具有特有的Sh2和Sh3保守结构域。2、运用Real-time PCR的方法,检测了IGF-I和CaN/NFATc1两个信号通路中14个基因在大白和通城猪出生后3天、21天、35天、60天、90天和120天六个不同生长发育阶段背最长肌的基因表达谱,发现14个基因中大部分基因在肌肉生长发育后期(60天以后)中外猪种中显著或极显著差异表达。3、以成年大白猪的心、肝、脾、肺、肾、子宫、卵巢、脂肪、半腱肌、股二头肌、咬肌和背最长肌12种组织为材料,利用半定量RT-PCR检测了上述14个基因的组织表达谱,结果发现GLUT4在心肌和骨骼肌中特异表达,IRS1在骨骼肌中相对高表达,其他基因在所检测的12种组织中几乎都表达。4、分离克隆了3个快肌纤维基因(MYH1、MYH2、MYH4)的5′侧翼序列和其中的AT2元件,结果发现AT2元件序列在大白和通城品种中没有结构突变。5、经过测序和序列比对发现了一个位于MYH4基因5′侧翼序列的SNP位点,并建立了该位点的PCR-AclI-RFLP分子标记检测方法;以华中农业大学试验猪场2003、2004年屠宰的大白猪×梅山猪杂种猪F2代群体为试验猪群,对该位点进行了性状关联分析,初步分析表明该位点与肌内脂肪和肌内水分极显著相关(p<0.01),与背最长肌大理石纹显著相关(p<0.05)。