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第一部分 CT引导下兔VX2肝癌模型的制作及综合评估
目的:探讨CT引导下兔VX2肝癌模型的制作及影像学和组织学评估。
方法:选择新西兰大白兔41只作为实验动物(前期9只,后期32只),采用CT引导下经皮穿刺瘤组织块种植于兔肝左中央叶。前期从左侧肋缘进针,术后未予抗感染;后期改为剑突下最大层面进针,术后抗感染3天。分别于接种后1W、2W、3W、4W行CT增强扫描及组织学观察。
结果:前期实验移植模型成瘤率为88.9%,腹壁种植转移率为55.6%,44.4%并发胸腔积液。后期实验肝癌移植模型成功率为93.7%,腹壁种植转移率为10.5%,无并发胸腔积液。CT平扫瘤体为低密度或等密度,均匀强化(2W)或环状强化(3W、4W);静脉期、延迟期呈低密度,但CT值较动脉期无明显下降。组织学上VX2为血管丰富的低分化鳞状细胞癌,2W出现点灶状凝固性坏死,3W出现肝内转移,4W出现大量凝固性坏死。自然生存时间为5W~9W,死亡原因主要为广泛肺和腹腔转移伴全身衰竭。
结论:CT引导下兔VX2肝癌模型的制作成功率高,并发症发生率低,进行兔VX2肝癌模型介入治疗实验研究宜选择2W为宜。
第二部分氩氦刀冷冻治疗引起的组织学变化
目的:本实验旨在通过观察TCAP治疗实验兔局部的病理学、超微结构变化及免疫组化的变化,来探讨TCAP的肿瘤治疗机制,为临床应用TCAP治疗实体瘤提供实验依据;同时对术中CT影像下冰球的有效冷冻范围进行进一步探讨。
方法:CT引导下成功造模兔VX2肝癌模型30只,随机分成6组。治疗组(第4、第5、第6组)采用CT引导下经皮穿刺TCAP。对照组穿刺置刀后未予冷冻治疗。分别于术后1d、1w、2w杀死,取冷冻范围内的组织,行电镜、HE和IHC染色,观察组织结构和超微结构变化。同时将治疗组病理坏死范围与第二循环过程中冰球大小进行对照研究(配对t检验)。
结果:光镜下TCAP后肿瘤组织侧与肝组织侧呈现明显的不同分带,即以冷刀为中心,肿瘤侧出现中央坏死区、凝固性坏死区和边缘细胞部分损伤区;肝组织侧出现中央坏死区、中间组织再生炎症区和边缘细胞部分损伤区。术后1d肝组织侧见炎细胞浸润,1W见肉芽组织和坏死肝细胞钙化,2W见成熟肉芽组织、坏死肝细胞钙化增多;而肿瘤侧未见无此现象。边缘细胞部分损伤区电镜下见凋亡细胞,TUNEL染色细胞核阳性,但随术后时间延长阳性细胞数逐渐减少。治疗组第1组、第2组术后病理坏死范围与第二循环过程中冰球大小无显著差异,第3组有显著差异。
结论:TCAP能使有效冷冻手术范围内的肿瘤组织产生凝固性坏死和凋亡,达到局部杀灭肿瘤组织的作用;CT监控下TCAP是安全、可靠、有效的。