乙型病毒肝炎是由乙肝病毒引起的，通过血液和体液传播的、以肝脏损害为主的传染病。全世界约有3.5亿的乙肝病毒携带者，其中九千万发展为继发性肝病，由于乙肝病毒感染及其继发病而死亡的患者每年超过100万人。我国是乙肝病毒感染的高发区，约1.2亿人感染乙肝病毒，3000万人患慢性肝炎，每年死于乙肝病毒导致的肝癌、肝硬化者约35万人。　　 目前乙肝病毒的检测方法中，较为广泛采用的是酶联免疫吸附实验(ELISA)法，将小鼠HBsAg特异性单克隆抗体包被到微孔板上，然后将样本加入微孔中，再与辣根过氧化物酶(HRP)标记的单克隆小鼠二抗结合后可直接检测不同的抗原决定簇，在样本中存在有HBsAg时，形成特异性免疫复合物，并被固相载体捕获。随后加入底物，在有HBsAg免疫复合物存在时，无色的底物经酶催化形成有颜色的终产物。终止酶反应后，用酶标仪测量吸光度值。　　 本文研究了最佳的抗乙型肝炎病毒表面抗原S蛋白的单克隆抗体(IgG mAbS1)的蛋白浓度和包被浓度，以及抗S蛋白另一表位单克隆抗体和辣根过氧化物酶结合物(IgG mAb S2-HRP)的稀释度。方法是将IgG mAb S1蛋白包被浓度分别为2.5、3、3.5、4μg/mL的微板，与不同稀释度(1∶30、1∶60、1∶120)的IgGmAbS2-HRP酶结合物交叉进行实验，当IgG mAb S1蛋白浓度为3.5μg/ml以及IgG mAbS2-HRP酶结合物的稀释度为1/30时，ELISA试剂盒的效果最优；另外将IgG mAbS2-HRP酶结合物分别存放在酶稳定剂Diapro StabilZyme、C18、C19中，在4℃和37℃的恒温条件下保存2周和4周，结果显示C18、C19稳定剂比Diapro StabilZyme酶稳定剂的保护作用更好，其中C19酶稳定剂显示了最佳的结果，为新HBsAg试剂盒酶结合物的保存提供了新的方法。通过上述条件的筛选，对乙型肝炎病毒表面抗原ELISA试剂盒部分关键点进行了优化，为后续工作的开展提供了基础。