【摘 要】
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目的:本研究使用高脂饮食结合小剂量链脲佐菌素（streptozotocin,STZ）注射建立糖尿病胃轻瘫（diabetic gastroparesis,DGP）大鼠模型,观察电针足三里、莫沙必利灌胃、电针联合莫沙必利对DGP大鼠的体重、摄食、血糖及胃动力调节作用的差异,从肠神经系统（enteric nervous system,ENS）角度探讨针药结合调节DGP大鼠胃动力功能障碍的部分神经机制,从
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目的:本研究使用高脂饮食结合小剂量链脲佐菌素（streptozotocin,STZ）注射建立糖尿病胃轻瘫（diabetic gastroparesis,DGP）大鼠模型,观察电针足三里、莫沙必利灌胃、电针联合莫沙必利对DGP大鼠的体重、摄食、血糖及胃动力调节作用的差异,从肠神经系统（enteric nervous system,ENS）角度探讨针药结合调节DGP大鼠胃动力功能障碍的部分神经机制,从而为临床针药结合治疗DGP提供部分理论依据。方法:选用健康SPF级Sprague Dawley（SD）雄性大鼠120只（180～200g）,随机分为正常组和造模组,适应性饲养1周,正常组大鼠继续采用普通饮食饲养,造模组大鼠采用高脂饮食饲养,1周后造模组予腹腔注射35mg/kg STZ诱导2型糖尿病（type 2 diabetes mellitus,T2DM）,糖尿病模型持续发展6周,发展期间持续高脂饮食饲养,并剔除血糖不合格大鼠,6周后将造模大鼠随机分成模型组、生理盐水组、电针组、莫沙必利组、针药结合组。生理盐水组给予生理盐水灌胃处理、电针组给予足三里电针干预、莫沙必利组给予枸橼酸莫沙必利溶液灌胃（2mg/kg）处理、针药结合组电针足三里结合莫沙必利灌胃干预,各组干预每日一次,连续5周。整个实验过程中每周测量各组大鼠的体重、摄食量、随机血糖。干预结束后采集血样检测空腹血糖、糖化血清蛋白、胰岛素、胰高血糖素样肽水平,计算胰岛素抵抗指数（insulin resistance index,HOMA-IR）,通过酚红试验检测胃排空率,球囊测压法检测胃窦收缩情况。收集胃窦组织,通过蛋白免疫印迹（Western blot）检测神经源性一氧化氮合酶（neuronal nitric oxide synthase,nNOS）、乙酰胆碱转移酶（choline acetyltransferase,ChAT）、色氨酸羟化酶-2（Tryptophan hydroxylase-2,TPH2）的蛋白水平,用荧光双标免疫组织化学法测定肌层神经元 PGP9.5/nNOS、PGP9.5/CHAT、PGP9.5/TPH2 共表达率。结果:1.与正常大鼠比较,模型大鼠体重、摄食量、血糖（包括空腹血糖、非空腹血糖）、糖化血清蛋白增加;血清胰岛素、HOMA-IR上升;胰高血糖素样肽（GLP-1）水平降低,液体胃排空率均降低,说明通过腹腔注射注射小剂量STZ联合高脂饮食饲养成功建立了 DGP大鼠模型。电针足三里、针药结合均降低了模型大鼠体重、摄食量、血糖水平,改善HOMA-IR,增加胃排空率,胃窦内压力、幅值,降低胃窦运动频率;莫沙必利降低了模型大鼠血糖水平,改善HOMA-IR,增加胃排空率,胃窦内压力、幅值,降低胃窦运动频率,其中针药结合效果优于单纯针刺及单纯莫沙必利灌胃。2.Western blot结果显示与正常大鼠比较,DGP模型大鼠胃窦nNOS、ChAT及TPH2的蛋白表达水平明显降低,电针足三里、莫沙必利灌胃、电针联合莫沙必利均上调了 nNOS、ChAT及TPH2的蛋白表达水平,其中针药结合效果优于单纯针刺及单纯莫沙必利灌胃。3.免疫荧光结果显示与正常大鼠比较,DGP模型大鼠胃窦PGP9.5/nNOS、PGP9.5/CHAT、PGP9.5/TPH2神经元共表达率降低,电针足三里、莫沙必利灌胃、电针联合莫沙必利上调了 PGP9.5/nNOS、PGP9.5/CHAT、PGP9.5/TPH2神经元共表达率,其中针药结合最优。结论:1.电针足三里和针药结合可以通过调节体重、摄食、血糖及胃动力全面治疗DGP,莫沙必利通过调节糖代谢和胃窦动力治疗DGP,与电针足三里和莫沙必利相比,针药结合治疗效果更为显著。2.三种干预方式均上调了 DGP模型大鼠胃窦nNOS、ChAT及TPH2的蛋白表达水平,修复了受损的肠神经元,针药结合效果最佳。综上所述,针药结合能够更显著地控制体重及摄食、调节血糖水平,上调胃窦nNOS、ChAT及TPH2蛋白表达水平、修复受损的肠神经元,改善胃窦运动功能,说明针药结合治疗DGP模型大鼠的疗效较单纯针刺或单纯莫沙必利灌胃更好,针药结合起到了协同的作用。
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