hsa-miR-4669在心脏手术相关性急性肾损伤中的早期预测价值

来源 :大连医科大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:wyq0221
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背景心脏手术相关性急性肾损伤(CSA-AKI)是由心脏手术所导致的不良后果,现根据改善全球肾脏病预后组织(KDIGO)指南,使用肌酐与尿量值来作为它的诊断及分期标准。但血清肌酐和尿量无法在最初24-48小时内监测到CSA-AKI的发生,存在一定的滞后性,因此,早期预测CSA-AKI就成为了目前的研究热点。近年来,有相关研究结果已经证实生物体内存在可用于早期诊断CSA-AKI的生物标志物,包括胱抑素C(Cys C)、中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白(NGAL)、白介素18(IL-18)、基质金属蛋白酶组织抑制剂-2(TIMP-2)、胰岛素样生长因子结合蛋白-7(IGFBP-7)等,然而这些生物标志物都存在一定的局限性,其中一些也参与了肾脏某些其他疾病的发展过程,尤其针对那些已存在基础肾脏疾病的患者来说,诊断CSA-AKI的特异性并不高。微小RNA(mi RNA)是一类非编码RNA分子,目前已发现了超过2500条人类成熟的mi RNA,其中一些被证明参与了CSA-AKI的病理生理过程,在早期诊断CSA-AKI方面具有重要意义。目的收集心脏术后患者血浆,用mi RNA测序的方法筛选出在CSA-AKI组和非CSA-AKI组差异性表达的mi RNA,再使用实时荧光定量PCR(Realtime PCR,RT-PCR)的方法进行临床验证,探讨微小RNA对心脏手术相关性急性肾损伤的早期预测价值。方法选取上海市东方医院2021年3月至10月的心脏手术的60例患者为研究对象,收集患者术后6h、12h的桡动脉血液各5ml,离心取上清液(3000转/分钟,10分钟)。并于-80℃冰箱保存。根据KDIGO标准,将60名患者的样本分成CSA-AKI-6h组、CSA-AKI-12h组、non CSA-AKI-6h组、non CSA-AKI-12h组,分别挑选3名发生CSA-AKI以及3名未发生CSA-AKI的患者术后6h、12h的血浆,以及3名健康志愿者的血浆,进行mi RNA测序筛选出差异性表达的mi RNA,然后再用选出的mi RNA用RT-PCR的方法进行临床验证。结果与non CSA-AKI-6h组相比,有16个mi RNA在CSA-AKI-6h组出现差异性表达:10个上调,6个下调。与non CSA-AKI-12h组相比,有3个mi RNA在CSA-AKI-12h组出现差异性表达:2个上调,1个下调。与CSA-AKI-6h组相比,有14个mi RNA在CSA-AKI-12h组出现差异性表达:6个上调,8个下调。与健康志愿者相比,有17个mi RNA在CSA-AKI-6h组出现差异性表达:8个上调,9个下调。与健康志愿者相比,有16个mi RNA在CSA-AKI-12h组出现差异性表达:4个上调,12个下调。与健康志愿者相比,有22个mi RNA在non CSA-AKI-6h组出现差异性表达:11个上调,11个下调的。与健康志愿者相比,有11个mi RNA在non CSA-AKI-12h组出现差异性表达:4个上调,7个下调。与non CSA-AKI-6h组相比,有4个mi RNA在non CSA-AKI-12h组出现差异性表达:3个上调,1个下调。通过分析对比发现,hsa-mi R-4669在CSA-AKI-12h组的表达量比non CSA-AKI-12h组、CSA-AKI-6h组及健康志愿者组均上调,同时,hsa-mi R-4669在non CSA-AKI-12h组与健康志愿者组以及在CSA-AKI-6h组与健康志愿者组的表达上无明显差异。故选取hsa-mi R-4669进行临床验证。选取的hsa-mi R-4669在CSA-AKI-12h组的表达量(3.16±0.44)(平均值±标准误)明显高于在non CSA-AKI-12h组的表达量(1.00±0.55)(P<0.05),也明显高于在CSA-AKI-6h组的表达量(1.00±0.57)(P<0.05);而在non CSA-AKI-12h组的表达量(2.08±0.55)与non CSA-AKI-6h组的表达量(1.00±0.55)无明显统计学差异(P>0.05)。术后12h血浆hsa-mi R-4669的AUC为0.70(95%CI:0.56-0.83)60名患者中CSA-AKI组(n=25)术后SCr与non CSA-AKI组(n=35)有统计学差异(P<0.05);CSA-AKI组术后e GFR与non CSA-AKI组有统计学差异(P<0.05);CSA-AKI组术后Cys C与non CSA-AKI组有统计学差异(P<0.05);CSA-AKI组术后ALT、AST、WBC与non CSA-AKI组无统计学差异(P>0.05);由此说明相比non CSA-AKI组,CSA-AKI组术后SCr、术后e GFR、术后Cys C明显升高,除了SCr外,e GFR与Cys C可能对CSA-AKI也有一定的诊断价值。CSA-AKI组术前SCr与non CSA-AKI组有统计学差异(P<0.05);CSA-AKI组术前e GFR与non CSA-AKI组有统计学差异(P<0.05);CSA-AKI组术前Cys C与non CSA-AKI组有统计学差异(P<0.05);CSA-AKI组术前LVEF与non CSA-AKI组有统计学差异(P<0.05);CSA-AKI组术中是否进行CPB与non CSA-AKI组有统计学差异(P<0.05)。CSA-AKI组患者年龄、性别、是否有高血压病、是否有糖尿病、术前ALT、AST、WBC与non CSA-AKI组均无明显统计学差异(P>0.05);由此说明,术前高SCr水平、术前低e GFR水平、术前低LVEF值、术前高Cys C水平以及术中行CPB可能是CSA-AKI发生的风险因素。结论1、mi RNA可能参与了CSA-AKI的早期发展过程。本研究通过mi RNA测序的方法,证明了CSA-AKI组与non CSA-AKI组mi RNA的表达有差异性,这就意味着mi RNA可能参与了CSA-AKI的发生。2、术后12小时hsa-mi R-4669对心脏手术相关性急性肾损伤具有早期预测价值。通过mi RNA测序的方法挑选出了hsa-mi R-4669,并用RT-PCR的方法进行了临床验证,证明了hsa-mi R-4669对心脏手术相关性急性肾损伤具有早期预测价值。
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