【摘 要】
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目的:探讨瘦素(Leptin)对主动脉瓣膜间质细胞(valvular interstitial cells,VICs)成骨分化的作用及其机制,明确Leptin体外刺激在VICs表型转化中的作用。方法:胶原酶消化法分
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目的:探讨瘦素(Leptin)对主动脉瓣膜间质细胞(valvular interstitial cells,VICs)成骨分化的作用及其机制,明确Leptin体外刺激在VICs表型转化中的作用。方法:胶原酶消化法分离并培养猪主动脉瓣膜间质细胞,采用100ng/ml Leptin刺激细胞24h,采用Trizol试剂提取细胞总RNA以及蛋白,通过qRT-PCR以及western blot分别测定RUNX-2的表达情况,同时检测NF-κB蛋白的表达情况。在Leptin刺激的同时,采用SN50干预VICs,再次检测RUNX-2的表达。结果:Leptin刺激导致RUNX-2 mRNA及蛋白表达显著上调(P<0.05);NF-κB总蛋白表达无显著变化,但Leptin组NF-κB蛋白磷酸化表达显著上调(P<0.05)。在Leptin干预的同时采用NF-κB特异性抑制剂SN50干预,发现SN50组RUNX-2蛋白表达较Leptin刺激组显著降低(P<0.05)。结论:Leptin能够诱导VICs向成骨细胞分化,并且这种作用是通过NF-κB相关信号通路实现的。
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