目的:当纳米粒进入机体时,生物体中的大量蛋白质吸附到纳米粒表面,形成复杂、多变的蛋白冠,严重影响纳米粒的血液循环、细胞摄取等体内行为。大量研究对纳米粒表面进行修饰改造,以减少蛋白冠形成或者调节蛋白冠组成,从而改善纳米粒在机体内的递送。如,PEG聚合物和亲水基团（-OH、-NH2）等修饰可以减少血浆蛋白的吸附,延长纳米粒的血液循环时间。然而,不同表面修饰可吸附不同蛋白导致后续体内行为产生差异,PEG化纳米粒可动态吸附anti-PEG,产生加速血液清除现象;-OH修饰的表面易吸附Ig G,导致C3沉积激活补体系统,而-NH2修饰的表面仅表现出轻微的免疫激活反应。在单一的表面修饰发挥的作用受限的情况下,我们推测将两种表面修饰结合使用,有利于吸附合适的蛋白冠。本研究制备3种不同表面修饰（-NH2和-OH比例）的脂质体,通过考察其蛋白冠组成和体内行为,筛选出具有合适表面修饰的脂质体,可以在不同组织中交换吸附适当的蛋白冠,从而提高肿瘤递送效率。方法:本研究根据前期研究合成具有不同P123和壳寡糖接枝比的PCO聚合物,并制备具有不同表面修饰（-NH2和-OH比例）的PCO脂质体。通过BCA蛋白含量测定和SDS-PAGE凝胶电泳法考察不同表面修饰的PCO脂质体吸附的蛋白冠组成及蛋白交换情况;以巨噬细胞、肿瘤细胞为模型从体外细胞水平考察吸附不同蛋白冠的PCO脂质体对细胞摄取的影响;经药动学、活体成像、组织切片等研究不同表面修饰的PCO脂质体在体内的血液循环及组织分布情况,并包载紫杉醇,考察PCO脂质体的抗肿瘤药效及安全性。此外,采用等温滴定量热法、超高分辨率显微镜对不同表面修饰的PCO脂质体蛋白冠动态变化的机制进行研究。结果:本研究根据课题组前期研究成功合成了具有不同P123和壳寡糖接枝比的3种PCO聚合物,并以PCO聚合物和磷脂为主要组成制备了3种粒径、电位相近而表面基团分布不同的PCO脂质体。经蛋白冠组成分析,PCO脂质体从血浆进入肝组织可动态吸附蛋白,形成不同组成的蛋白冠,且蛋白吸附量随脂质体表面的-NH2修饰量增加而减少,其中-NH2修饰量最高（-NH2和-OH比例为0.37）的PCO1脂质体的蛋白吸附量最少;以血液中单核巨噬细胞J774和肝巨噬细胞Kupffer细胞为模型考察蛋白冠对细胞摄取的影响,结果显示血浆蛋白冠的形成对巨噬细胞摄取影响不明显,而肝间质蛋白冠的吸附可大幅度提高巨噬细胞的摄取水平。吸附肝间质蛋白量最低的PCO1脂质体在巨噬细胞中始终保持较低的摄取水平,尤其是在Kupffer细胞中,PCO1脂质体组仅为阳性对照组PEG lipo脂质体的12.8%。药动学和活体成像结果显示PCO1脂质体的血液循环时间延长至PEG lipo脂质体的2.2倍,而肝蓄积量降低至PEG lipo脂质体的66.6%。当脂质体从血浆进入肿瘤组织后,PCO脂质体表面的蛋白冠同样发生变化,然而,与肝间质蛋白冠相反的是,肿瘤间质蛋白吸附量随脂质体表面的-NH2修饰量增加而增加,其中-NH2修饰量最高的PCO1脂质体吸附量最高,且吸附肿瘤间质蛋白的PCO1脂质体的细胞摄取量明显高于PCO2和PCO3脂质体,这与其大量吸附OPN、CD44等肿瘤间质蛋白有关。血液循环时间的延长和肿瘤细胞摄取水平的提高,使大量PCO1脂质体在肿瘤组织富集;包载紫杉醇后,PTX-PCO1脂质体的抗肿瘤药效显著。在A549和Hela细胞中的IC50值低达0.2μg/m L,体内给药21天的抑瘤率可达90%左右,抗肿瘤效果良好且安全无毒。此外,对PCO脂质体表面的蛋白交换行为进行机制研究,经Dot blot鉴定血浆和肝间质蛋白冠中的代表性蛋白分别为白蛋白和Ig G;等温滴定量热法测定白蛋白-脂质体的结合亲和常数低于Ig G-脂质体;且超高分辨率显微镜可直接观察到脂质体表面白蛋白和Ig G的竞争吸附现象。其中,Ig G与PCO1脂质体的结合亲和常数低于PCO2、PCO3脂质体,是其吸附较少Ig G的主要原因。Ig G吸附量的降低可以减少巨噬细胞对脂质体的摄取量,是PCO1脂质体巨噬细胞摄取量低的重要原因。结论:PCO1脂质体作为药物载体可提高化疗药物的肿瘤递送效率,并为药物递送载体的设计提供思路。