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目的 观察大鼠肝脏缺血再灌注损伤以及维拉帕米和生脉注射液对再灌注损伤的干预作用。 方法 将40只雌性wistar大鼠分为4组,每组10只:即假手术组(A组)、缺血再灌注组(B组)、维拉帕米组(C组)和生脉注射液组(D组)。A组开腹30min后再关腹;B组开腹后夹闭左肝蒂30min,再关腹;C组在开腹前经尾静脉注射维拉帕米,10min后开腹,夹闭左肝蒂30min,然后关腹;D组在开腹前3天每天经腹腔注射生脉注射液,开腹,夹闭左肝蒂30min,然后关腹。各组均在关腹48h后再开腹,每只大鼠取缺血肝组织两块,立即用Western blot法检测热休克蛋白70(HSP70)的表达,用TBA(硫代巴比妥酸)法检测丙二醛(MDA),并将肝组织经福尔马林固定、石蜡包埋、切片、HE染色光镜下观察;由腹主动脉抽血,分离血清用放射免疫分析试剂盒检测肿瘤坏死因子(TNF-α),用全自动生化分析仪测定谷丙转氨酶(ALT)和天门冬氨酸转氨酶(AST)。 结果 (1) A组的各检测指标变化小,HSP70表达最少,光镜下肝组织形态正常。(2) B组的各检测指标变化最大,HSP70表达最多,光镜下肝组织形态破坏最严重。(3) C组和D组的各观察指标均介于以上两组之间:ALT含量分别为109.13±18.91、131.75±26.23(U/L),比B组183.89±27.90(U/L)含量显著降低(q=10.08,7.03,P<0.01),C,D两组之间差异有显著性(q=2.97,P<0.05);AST为269.50±51.95、281.63±52.54(U/L),比B组331.11±49.51(U/L)含量显著降低(q=3.82,3.07,P<0.05),C,D两组之间无差异(q=0.73,P>0.05);TNF-α为143.69±16.94、146.14±14.39(pg/ml),比B组177.56±24.50(pg/ml)含量显著降低(q=3.72,3.45,P<0.05),C,D两组之间无差异(q=0.26,P>0.05);MDA为1.11±0.10、1.15±0.08(nmol/ml),比B组1.31±0.22(nmol/ml)含量显著降低(q=3.61,2.89,P<0.05),C,D两组之间无差异(q=0.70,P>0.05);C,D两组HSP70的表达明显少于B组,而C组HSP70的表达略少于D组;肝组织切片观察,C,D两组肝细胞肿胀、坏死程度均较B组轻。 结论 大鼠肝脏缺血再灌注后,肝组织损伤明显,其发生机制与钙超载和氧自由基生成有关;在大鼠肝脏缺血再灌注前给予维拉帕米或生脉注射液,可明显改善缺血再灌注后肝组织的损伤程度。