【摘 要】
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植物内生真菌次生代谢产物种类繁多,是药物先导化合物的重要来源之一。前期研究发现,一株来源于药用植物黄花蒿(Artemisia annua Linn.)的内生真菌Aspergillus fumigatus SPS-0
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植物内生真菌次生代谢产物种类繁多,是药物先导化合物的重要来源之一。前期研究发现,一株来源于药用植物黄花蒿(Artemisia annua Linn.)的内生真菌Aspergillus fumigatus SPS-02能代谢一类新型光敏剂——苝醌类化合物。本论文以A.fumigatus SPS-02为研究对象,开展了其代谢产物的分离鉴定、活性评价及发酵工艺优化研究工作。论文第一部分采用高盐Czapek培养基,对A.fumigatus SPS-02进行扩大培养。利用制备液相从中分离得到一个代谢产物,经核磁共振、质谱等现代波谱学手段鉴定,确定该化合物为8-chloro-3,6a,7,9,10-pentahydroxy-9,8,7,6a-tetrahydroperylen-4(6aH)-one(1)。氯代苝醌为首次从植物内生烟曲霉中获得。生物活性研究表明,氯代苝醌对大肠杆菌菌株(Escherichia coli ATCC 25922)和白色念珠菌(Canidia albicans ATCC10231)具有良好的抑制作用,其MIC值分别为0.78和1.56μM;此外,氯代苝醌对人肺癌细胞A549具有较强的增殖抑制作用,其IC50值为12.79μM。论文第二部分以氯代苝醌的产量为指标,以高盐Czapek液态培养基为基础培养基,采用单因素、正交以及响应面实验优化,开展发酵工艺优化。最终确定最佳发酵培养基组成为:蔗糖30 g/L,磷酸氢二钾1 g/L,硝酸钠4 g/L,硫酸镁0.5 g/L,氯化钾0.5 g/L,硫酸亚铁0.01g/L,氯化钠70 g/L,蒸馏水1000 mL;其确定最佳发酵条件为:温度30℃,发酵时间9.4 d,初始7.5 pH,摇床转速200 rpm。经过优化,氯代苝醌的产量可提高至0.926 mg/L(与模拟最大值0.921 mg/L比较,偏差仅为1.79%),与氯代苝醌的初始产量0.429 mg/L相比较,提高了115%。研究结果可为氯代苝醌的放大生产提供参考。
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