【摘 要】
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黄体是卵泡排卵后形成的一种短暂的内分泌腺,在正常生殖周期的调节和妊娠的维持中发挥着重要作用。在没有怀孕的情况下,黄体经历退化或溶解的过程。有研究表明,在自发和诱导的黄体退化过程中,许多动物均发生了细胞凋亡。所以,本试验通过检测多种凋亡基因在猪黄体不同时期退化中的情况,为进一步阐明在猪黄体退化的分子机制提供依据。本试验以猪黄体为研究对象,选取初期、中期、后期和白体四个时期的猪黄体,通过孕酮检测、TU
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黄体是卵泡排卵后形成的一种短暂的内分泌腺,在正常生殖周期的调节和妊娠的维持中发挥着重要作用。在没有怀孕的情况下,黄体经历退化或溶解的过程。有研究表明,在自发和诱导的黄体退化过程中,许多动物均发生了细胞凋亡。所以,本试验通过检测多种凋亡基因在猪黄体不同时期退化中的情况,为进一步阐明在猪黄体退化的分子机制提供依据。本试验以猪黄体为研究对象,选取初期、中期、后期和白体四个时期的猪黄体,通过孕酮检测、TUNEL染色和荧光定量PCR技术对细胞凋亡基因Caspase-3、Caspase-8、Caspase-9、TNF-α、Bcl-2及Bax在猪黄体各个时期的变化进行了检测。结果显示:1.孕酮水平检测结果:中期孕酮浓度达到顶峰显著高于其它三个时期(p<0.05),中期之后孕酮浓度呈下降趋势,后期和白体的浓度显著低于初期(p<0.05)。2.TUNEL染色结果:初期和中期呈阴性反应,几乎观察不到凋亡细胞,随着猪黄体的退化,后期和白体呈阳性反应,有较多的细胞凋亡出现。3.随着猪黄体退化,Caspase-3表达量逐渐上升,在白体期达到最高值且显著高于其它三个时期(p<0.05),后期表达量显著高于初期和中期(p<0.05),初期与中期无显著性差异(p>0.05)。Caspase-8基因在各时期均有mRNA的表达,随着猪黄体逐渐退化,表达量呈上升趋势,初期和中期表达量差异不显著(p>0.05)。Caspase-9基因在初期和中期表达量无显著性差异(p>0.05),随着猪黄体退化,表达量呈上升趋势,在白体期时表达量最高,且显著高于其它三个时期(p<0.05)。TNF-α基因在初期和中期表达量无显著性差异(p>0.05),随着猪黄体逐渐退化,表达量呈上升趋势,白体期的表达量显著高于后期(p<0.05)。随着猪黄体退化,Bcl-2/Bax的比率呈下降趋势,表明凋亡过多。本次实验可以得到这样的结论:凋亡基因Caspase-3、Caspase-8、Caspase-9,TNF-α初期与中期表达量无显著性差异,随着猪黄体逐渐退化,表达量逐渐上升,在白体期达到最高值且显著高于其它三个时期,而随着猪黄体退化,Bcl-2/Bax比率下降。说明以上基因可能参与了猪黄体凋亡。
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