【摘 要】
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microRNAs(miRNAs)是一类长约21~25 nt的非编码小分子RNA,已有大量研究表明miRNAs参与调控脂肪形成。但miR-23b-3p在脂肪形成中的作用未见报道。本研究选用3T3-L1前脂肪细胞
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microRNAs(miRNAs)是一类长约21~25 nt的非编码小分子RNA,已有大量研究表明miRNAs参与调控脂肪形成。但miR-23b-3p在脂肪形成中的作用未见报道。本研究选用3T3-L1前脂肪细胞作为研究对象,探讨miR-23b-3p对3T3-L1前脂肪细胞增殖和成脂分化的影响。通过化学合成的mi R-23b-3p模拟物mimic和抑制物inhibitor成功转入3T3-L1前脂肪细胞后,利用CCK-8法和流式细胞术检测miR-23b-3p对3T3-L1前脂肪细胞增殖的影响;并通过实时荧光定量PCR和Western blot检测细胞周期基因CyclinD1和CDK4以及成脂标志基因PPARγ和FABP4的表达情况;油红O染色测定甘油三酯积累情况。得到如下结果:1.过表达miR-23b-3p抑制3T3-L1前脂肪细胞增殖,导致细胞G1期阻滞,CyclinD1和CDK4在mRNA和蛋白水平极显著下调;抑制miR-23b-3p的表达能够促进3T3-L1前脂肪细胞增殖,G1期细胞比例减少,CyclinD1和CDK4在m RNA和蛋白水平显著或极显著上调。2.在3T3-L1前脂肪细胞成脂分化过程中,miR-23b-3p的表达水平上调。3.过表达miR-23b-3p,甘油三酯积累增加,PPARγ和FABP4在m RNA和蛋白水平显著或极显著上调;抑制miR-23b-3p表达,甘油三酯积累减少,PPARγ和FABP4在mRNA和蛋白水平极显著下调。结论:miR-23b-3p能够抑制3T3-L1前脂肪细胞增殖并促进其分化为成熟脂肪细胞。
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