病害是罗非鱼养殖中的问题,病原主要是无乳链球菌（Streptococcus agalactiae）,但是近年来国内外新爆发的罗非鱼湖病毒病也造成了大规模罗非鱼死亡事件,导致巨大的经济损失,严重制约着罗非鱼水产养殖业的发展。本研究中主要在我国罗非鱼主要养殖区地区,进行了罗非鱼湖病毒病分子流行病学调查研究,建立了罗非鱼湖病毒检测技术,并对分离鉴定的罗非鱼湖病毒基因组结构进行了分析。此外。我们研制了罗湖病毒病亚单位疫苗,并对其免疫效果进行了初步评价。主要研究结果如下:1.罗非鱼湖病毒病分子流行病学调查2018年10月和2019年10月,对罗非鱼养殖地区——雷州、化州、吴川、高州和廉江5个地区进行了罗非鱼湖病毒感染情况调查,共采集了罗非鱼样本150个。结果发现,雷州48个样本中阳性率为62.5%;化州21个样本中检测结果均为阴性;吴川21个样阳性率为19%;高州15个样本阳性率为13.3%;廉江45个样本中阳性率为24.4%。结果表明罗非鱼湖病毒在罗非鱼养殖区流行。2.罗湖病毒全基因组测序及序列分析PCR扩增了罗非鱼湖病毒节段1～10并进行了测序,结果发现各片段大小分别为1641 bp、1471 bp、1371 bp、1250 bp、1099 bp、1.044 bp、777 bp、657 bp、548 bp和465 bp,对片段1进行序列比对分析蛋白分子质量为57KD,无跨膜结构,三级结构复杂。3.荧光绝对定量快速罗湖病毒检测技术的建立研究根据罗湖病毒节段8保守区设计了一对特异性引物,建立了检测罗湖病毒的SYBR GreenⅠ实时荧光定量RT-PCR方法,并对该方法的特异性、灵敏度和重复性进行了评价。结果显示:标准曲线在2.5×10¹⁰～2.5×10⁴拷贝数之间有良好的线性关系（相关系数R²=0.999）,检测限为2.5×10⁰个拷贝数。试验内及试验间变异系数分别为0.23%～0.78%与0.54%～2.92%,重复性强;对水生动物其他病毒和细菌均无扩增反应,具有很好的特异性。4.病毒免疫蛋白的表达及亚单位疫苗的初步研究应用DNA重组技术构建原核表达质粒p ET28a,将重组质粒转入大肠杆菌BL21进行表达和纯化重组蛋白,对重组蛋白的免疫原性进行了初步评价,结果显示:将罗非鱼湖病毒节段10段基因p ET28a连接构建原核表达质粒,表达的融合蛋白大小为17KD。重组蛋白免疫健康罗非鱼免疫后的第7d,特异性抗体Ig M显著升高（P<0.05）,第14d、21、28天检测时极显著升高（P<0.01）。实验组重组蛋白保护率为33%。