【摘 要】
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植物材料经微生物发酵产生的富含活性物质的混合液被称作植物发酵提取物(Plant Fermentation Extracts,PFEs),具有抗氧化、抗菌、美白、抗衰老等特性,广泛应用于化妆品和保健品等产品。甘油是化妆品行业最主要的原料之一,目前植物活性提取物仅是关注某些功能,未同时考虑化妆品行业最主要的原料合成。本研究考察不同微生物发酵不同植物底物制备PFEs的基础上,通过葡萄干发酵大量合成甘油的
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植物材料经微生物发酵产生的富含活性物质的混合液被称作植物发酵提取物(Plant Fermentation Extracts,PFEs),具有抗氧化、抗菌、美白、抗衰老等特性,广泛应用于化妆品和保健品等产品。甘油是化妆品行业最主要的原料之一,目前植物活性提取物仅是关注某些功能,未同时考虑化妆品行业最主要的原料合成。本研究考察不同微生物发酵不同植物底物制备PFEs的基础上,通过葡萄干发酵大量合成甘油的同时提高PFEs的活性物质,获得一种功能性甘油的PFEs生产新方法,同时考察发酵对其活性物质含量及功能活性的影响,并将其应用于化妆品乳液中。(1)根据自由基清除能力指标筛选得到2种高抗氧化活性植物材料(葡萄籽、枸杞)和3株菌株(产甘油假丝酵母、布拉氏酵母、鼠李糖乳杆菌),组合发酵制备不同PFEs并进行功能性分析,结果表明:植物材料能促进3株菌分泌蛋白酶、脂肪酶、纤维素酶、β-葡萄糖苷酶、β-半乳糖苷酶进行植物发酵;葡萄籽PFEs中总酚和总黄酮分别为4.3±1.2 mg GAE·m L-1(GAE表示以没食子酸计)和1.3±0.4 mg RE·m L-1(RE表示以芦丁计),其DPPH(1,1-二苯基-2-三硝基苯肼)自由基清除率和羟自由基清除率与常规提取物相比分别提高5.0%-33.0%和157.1%-178.1%;葡萄籽和枸杞PFEs均具有明显的酪氨酸酶抑制活性;鼠李糖乳杆菌PFEs具有较强抑菌活性。(2)基于上述葡萄干内葡萄籽的PFEs的功能性明显的结果,进一步探索利用葡萄干通过产甘油假丝酵母发酵制备功能性甘油(定义为含有多种活性物质的甘油,以区分常规发酵法制备的甘油)的新方法。确定技术路线为:葡萄干蒸煮10 min,添加0.1%(w/w)纤维素酶于50°C处理36 h,培养基含葡萄糖230.0±5.4 g·L-1,以产甘油假丝酵母为菌株发酵,5-L上罐甘油终产量为100.5±7.2 g·L-1,酚及黄酮类物质分别为3.4±0.7 mg GAE·m L-1和0.5±0.1 mg RE·m L-1。功能性甘油DPPH自由基清除率、羟自由基清除率、酪氨酸酶抑制率分别为63.2±1.3%、73.9±2.1%和92.3±5.9%,明显优于不添加植物底物发酵(葡萄糖为碳源)及纯甘油溶液(110.0 g·L-1)。不同浓度甘油提取葡萄干总酚和总黄酮实验表明:产甘油假丝酵母原位合成甘油有助于葡萄干中活性物质溶出并提高功能活性。(3)对获得的功能性甘油进行功能性评价和应用。结果表明:功能性甘油处理后大肠杆菌胞内超氧化物歧化酶和过氧化氢酶活性明显提高,细胞内活性氧水平下降了1.1%-85.9%;功能性甘油与酪氨酸酶活性中心铜离子结合,并导致酪氨酸酶结构变化而抑制其活性。以功能性甘油和鼠李糖乳杆菌发酵枸杞PFEs为主要功效成分制备化妆品乳液,化妆乳液能够在离心、冷、热、冷热交替环境中保持体系稳定,其DPPH自由基清除率、羟自由基清除率、酪氨酸酶抑制活性依赖功能甘油添加量,1.5%(w/v)时分别为31.3±1.3%、14.5±1.0%和29.5±1.9%,优于市售产品,化妆品乳液放置10 h后保湿率仍保持在99.0%以上,可广泛应用于化妆品产品。
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