目的:探讨在前列腺癌PC3细胞中COX2基因表达对其CD133⁺CD44⁺细胞比例的影响,为临床研发治疗前列腺癌寻找新靶标提供实验依据。材料与方法:取处于对数生长期的PC3细胞进行实验。（1）不同浓度塞来昔布对PC3细胞中COX2表达及CD133⁺CD44⁺细胞比例的影响:实验分为空白组、DMSO组、25μmol/L组、50μmol/L组,（1）Western Blot检测各组COX2蛋白表达水平;（2）ELISA法测定各组COX2下游产物之一前列腺素E₂表达水平;（3）流式细胞仪检测各组CD133⁺CD44⁺细胞的比例。（2）不同浓度塞来昔布对PC3细胞微球体形成及其CD133⁺CD44⁺细胞比例的影响:（1）实验分为DMSO组、25μmol/L组、50μmol/L组,使用超低粘附细胞培养板,在无血清的培养基里培养PC3细胞,并给予塞来昔布处理2周,在低倍显微镜下观察PC3细胞中形成的微球体数（至少50个细胞为一个微球体）;（2）流式细胞仪检测DMSO组、50μmol/L塞来昔布处理组中CD133⁺CD44⁺细胞的比例。（3）COX2基因过表达对PC3细胞中CD133⁺CD44⁺细胞比例的影响:实验分为空白组、空载体组、COX2过表达组,构建COX2过表达质粒,转染至PC3细胞,（1）Western Blot检测各组COX2蛋白表达水平;（2）ELISA法测定各组前列腺素E₂表达水平;（3）流式细胞仪检测各组CD133⁺CD44⁺细胞的比例。结果:（1）（1）Western Blot检测结果显示:空白组、DMSO组、25μmol/L组、50μmol/L组中COX2蛋白相对β-actin蛋白表达水平分别为:1.06±0.05、1.07±0.07、0.58±0.04、0.18±0.03,与空白组及DMSO组相比,塞来昔布处理组COX2蛋白表达水平降低,差异具有显著性（P<0.05）;（2）ELISA法测定结果显示:空白组、DMSO组、25μmol/L组、50μmol/L组中前列腺素E₂（PGE₂）表达水平分别为:139.0±4.7、132.0±2.6、85.0±2.6、60.0±4.1pg/ml,与空白组及DMSO组相比,塞来昔布处理组前列腺素E₂表达水平降低,差异具有显著性（P<0.05）;（3）采用流式细胞仪检测空白组、DMSO组、25μmol/L组、50μmol/L组中CD133⁺CD44⁺细胞比例分别为:1.38±0.02%、1.27±0.02%、1.04±0.03%、0.59±0.01%,与空白组及DMSO组相比,塞来昔布处理组中CD133⁺CD44⁺细胞比例减少,差异具有显著性（P<0.05）。（2）（1）在低倍显微镜下观察DMSO组、25μmol/L组、50μmol/L组每个视野微球体形成数分别为12.0±0.9、6.1±0.91、3.0±0.9个;提示塞来昔布抑制PC3细胞微球体的形成数;（2）使用流式细胞仪检测DMSO组、50μmol/L组中CD133⁺CD44⁺细胞比例分别为:40.4±0.6%、17.3±0.47%,两组比较差异具有显著性（P<0.05）。（3）（1）成功构建过表达载体,并将其成功转染到PC3细胞中;（2）Western Blot检测结果显示:空白组、空载体组、COX2过表达组中COX2蛋白表达相对水平分别为:0.67±0.02、0.64±0.04、1.16±0.03,与空白组及空载体组相比,COX2过表达组COX2蛋白表达水平增多,差异具有显著性（P<0.05）;（3）ELISA法测定结果显示:空白组、空载体组、COX2过表达组中前列腺素E₂表达水平分别为:140.0±6.5、145.0+3.8、233.0±3.2pg/ml,与空白组及空载体组相比,COX2过表达组前列腺素E₂表达水平增多,差异具有显著性（P<0.05）;（4）使用流式细胞仪检测空白组、空载体组、COX2过表达组中CD133⁺CD44⁺细胞比例分别为:1.06±0.05%、1.17±0.04%、2.04±0.08%,与空白组及空载体组相比,COX2过表达组中CD133⁺CD44⁺细胞比例增多,差异具有显著性（P<0.05）。结论:（1）塞来昔布可通过抑制PC3细胞中COX2表达从而减少以CD133⁺CD44⁺为标志物的肿瘤干细胞比例。（2）COX2表达水平上调可以增加PC3细胞中CD133⁺CD44⁺细胞的比例。