肥胖人群患糖尿病及心血管疾病的风险比正常人群高。经检测,肥胖人群体内的游离脂肪酸含量明显比正常人高,尤其是饱和脂肪酸的含量。我们猜测过量的饱和脂肪酸会引起体内发生慢性炎症,进一步诱导糖尿病及心血管等代谢综合征的发生。慢性炎症反应是心脑血管发生病变的主要机理,故本文旨在探索饱和脂肪酸诱导血管内皮细胞慢性炎症的发生机制。方法及结果:我们用多种饱和脂肪酸处理血管内皮细胞,分别提取细胞浆和细胞核蛋白,用蛋白印迹法检测蛋白表达水平,发现饱和脂肪酸能持续性地使细胞核中的NF-κB p65低水平升高,这和LPS刺激的NF-κB p65短暂地高水平状态不同。与LPS刺激产生的急性炎症反应相比,饱和脂肪酸诱导的更像是慢性炎症反应。实验结果显示,4种饱和脂肪酸不会引起细胞核和细胞浆中的NF-κB抑制蛋白α(IκBα)发生变化,且IκB激酶(IKK)抑制剂IKK16也不能阻止这4种饱和脂肪酸诱导核内NF-κB p65低水平升高。通过上述IκBα和IKK的实验结果,验证了饱和脂肪酸诱导NF-κB活化不是通过NF-κB经典信号通路。我们猜测饱和脂肪酸作为原料可能参与到二酰甘油(DAG)的合成,发挥第二信使的作用;结果显示DAG合成限速酶GPAT的两个抑制剂FGS67和NEM均能抑制饱和脂肪酸十四烷酸诱导的NF-κB p65入核。随后,将PKC的两个抑制剂Sotrastaurin和Go6983去预处理细胞后,观察到两者均能阻断十四烷酸诱导NF-κB p65在细胞核中积累。同时,十四烷酸会降低PKCζ和HDAC5的表达,而Sotrastaurin能够逆转这种情况,且HDAC5抑制剂LMK235会继续维持十四烷酸诱导的这种状态。为了解析PKCζ与HDAC5之间的关系,我们包装慢病毒使其携带PKCζ基因的shRNA,用于感染细胞,干扰细胞PKCζ的RNA,降低其表达。经实验发现,PKCζ敲低组的HDAC5表达也随之大幅降低,且加入十四烷酸后会增强这种效应;同时,敲低PKCζ后引起细胞胞核中的总p65表达上调,而乙酰化p65(L310)未上调,但加入十四烷酸后会明显增强总p65和乙酰化p65(L310)的表达。结论:我们发现饱和脂肪酸诱导转录因子NF-κB持续活化不是通过经典途径中IΚB磷酸化而活化,而是进入细胞内合成DAG去激活PKC家族(除PKCζ),活化的PKC分子会抑制PKCζ,低水平的PKCζ会使HDAC5也处于低水平状态,从而使NF-κB p65不能及时去乙酰化而停滞在细胞核中,并维持一定水平的乙酰化,持续与特定DNA结合位点特异性结合,激活目的基因的转录,持续加重炎症反应。本文提出的是一个全新的慢性炎症特有的机理,对慢性炎症相关疾病的治疗有重要的指导意义。