【摘 要】
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目的观察针刺“大椎”、“肾俞”、“足三里”对实验性自身免疫性脑脊髓炎(Experimental autoimmune encephalomyelitis,EAE)小鼠体重损失、神经功能缺损评分、脑组织脱髓鞘情况、脑组织磷酸化P38丝裂原活化蛋白酶和IL-17的影响,验证针刺对EAE的治疗作用,探究针刺治疗EAE的相关机制,为临床治疗多发性硬化(multiple sclerosis,MS)提供理论依
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目的观察针刺“大椎”、“肾俞”、“足三里”对实验性自身免疫性脑脊髓炎(Experimental autoimmune encephalomyelitis,EAE)小鼠体重损失、神经功能缺损评分、脑组织脱髓鞘情况、脑组织磷酸化P38丝裂原活化蛋白酶和IL-17的影响,验证针刺对EAE的治疗作用,探究针刺治疗EAE的相关机制,为临床治疗多发性硬化(multiple sclerosis,MS)提供理论依据。方法将40只雌性C57BL/6小鼠随机分为空白组、模型组、激素组、针刺组,空白组小鼠不作处理,其余组采用髓鞘少突胶质细胞糖蛋白35-55(MOG35-55)制备的完全抗原将小鼠诱导成EAE模型。造模后第14天开始,空白组及模型组每日固定,并用生理盐水灌胃。激素组每日与醋酸泼尼松灌胃。针刺组小鼠针刺“大椎”、双侧“肾俞”、双侧“足三里”。记录小鼠体重和神经功能缺损评分。免疫第28天后对脑组织进行取材,用LFB染色观察病理变化,检测脑组织中p-p38MAPK免疫组化表达及p-p38MAPK的WB表达,检测脑组织中IL-17的表达水平。结果(1)小鼠体重变化:实验开始时四组小鼠体重大致相同(P>0.05);免疫第10天,空白组小鼠体重大于模型组、针刺组、激素组(P<0.05),模型组、针刺组、激素组三组小鼠体重无差别(P>0.05);免疫第22天后,模型组小鼠体重小于针刺组、激素组(P<0.05),且激素组小鼠体重大于针刺组(P<0.05)。(2)小鼠神经功能缺损评分:免疫第10天,模型组、针刺组、激素组的神经功能缺损评分无差异(P>0.05);免疫第16天,针刺组和激素组评分低于模型组(P<0.05),针刺组和激素组评分未出现差异(P>0.05);免疫第22天后,针刺组评分高于激素组(P<0.05)。(3)脑组织LFB髓鞘染色:空白组脑细胞结构正常,细胞排列紧密,髓鞘致密无脱失;模型组脑细胞排列疏松,可见大量脱失髓鞘的细胞,呈空泡样改变;针刺组和激素组可见部分脑细胞髓鞘脱失,散在空泡样改变,但髓鞘脱失部位较模型组少,程度较模型组低。(4)脑组织p-p38MAPK免疫组化及Western blot检测:空白组p-p38MAPK蛋白表达水平最低,模型组p-p38MAPK蛋白表达水平最高,二者差异明显(P<0.05),针刺组和激素组p-p38MAPK蛋白表达水平高于空白组(P<0.05),但低于模型组(P<0.05),针刺组和激素组p-p38MAPK蛋白表达水平无差别(P>0.05)。(5)IL-17:空白组小鼠脑组织内IL-17含量最少,模型组小鼠脑组织内IL-17含量最多,两组小鼠脑组织内IL-17含量差异有统计学意义(P<0.05);针刺组和激素组小鼠脑组织内IL-17含量较空白组高(P<0.05),但低于模型组(P<0.05),针刺组和激素组小鼠IL-17含量无差异(P>0.05)。结论(1)针刺可以减少EAE小鼠体重损失程度,降低EAE小鼠神经功能缺损评分。(2)针刺可以降低EAE小鼠脑内髓鞘脱失程度,提示针刺可以抑制脑组织髓鞘脱失。(3)针刺可以降低EAE小鼠脑内p-p38MAPK的表达,提示针刺可以抑制p38MAPK信号通路。(4)针刺可以降低EAE小鼠脑内IL-17的表达,提示针刺可以减轻炎症反应。
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