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乳腺癌是女性发病率较高的恶性肿瘤之一,约占全身各种恶性肿瘤的7-10%,已成为威胁女性健康的主要病因。然而目前,乳腺癌仍然缺少特异性的诊断标记物或治疗靶点。本实验室之前的研究发现小分子GTP酶蛋白Rab34在恶化程度高的乳腺癌病人及其癌旁组织特异性的高表达,并能促进乳腺癌细胞的迁移能力。由于胚胎发育以及肿瘤的发生、恶化常常伴随着上皮细胞间质转分化(EMT)的发生,所以研究Rab34是否与EMT存在某种关联,进而影响胚胎的发育以及细胞的迁移或侵袭能力,以及探究Rab34是否能做为乳腺癌的一个诊断标记物或者治疗的药物靶点及其相关的分子机制就成为了我们研究的目的和重点。本论文以斑马鱼为主要研究对象,探究Rab34对其发育的影响。首先,在斑马鱼中存在zRab34a和zRab34b两种形式,免疫荧光实验发现zRab34a与hRab34(human Rab34)的定位一致,主要定位于高尔基体并且可以把溶酶体募集到核周,而zRab34b则无此现象。然后,我们在斑马鱼中通过显微注射构建了过表达zRab34a的模型,以及应用CRISPR/cas9基因编辑技术建立了敲除zRab34a的纯合品系。通过对胚胎发育过程的跟踪,在原肠运动和体节期,应用胚胎整体的原位杂交和抗体染色技术分析,发现无论是过表达zRab34a还是敲除zRab34a都影响斑马鱼的发育,特别是敲除zRab34a后会更显著抑制斑马鱼的发育。然后,我们构建稳定敲低Rab34表达的MDA-MB-231乳腺癌细胞系,以斑马鱼和裸鼠为对象,进行体内肿瘤细胞移植实验,探究Rab34对乳腺癌细胞的迁移/侵袭的影响。结果表明乳腺癌细胞敲低Rab34后,其迁移/侵袭能力受到显著抑制,这提示我们Rab34可能与上皮细胞间质转分化(EMT)存在某种关联,为此我们选定EMT的常见的标记物E-cadherin对早期发育阶段斑马鱼胚胎进行染色,初步发现Rab34或能促进EMT的发生。以上研究表明,Rab34可能是通过促进EMT的发生影响胚胎的发育进程以及促进乳腺癌细胞的迁移/侵袭,由此或可做为乳腺癌潜在的诊断标记物或药物靶点。