沉积物中微囊藻毒素检测方法研究

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当前,水体富营养化已成为全球性的环境问题。在富营养化水体中,藻类异常繁殖,形成水华。蓝藻水华是最常见的淡水水华。调查显示,淡水湖泊中发生的水华大多数是有毒的,在这些毒素中又以铜绿微囊藻、鱼腥藻和颤藻等所产生的微囊藻毒素(microcystin,MC)最为普遍。近年来,MC所引起的人类疾病和死亡事件时有报道,因而引起了社会的广泛关注。各国学者对MC的种类结构、产生机制、毒性毒理和降解去除等方面进行了研究。 MC在水体中的去除、转化等规律目前尚无明确结论,但研究普遍认为稀释作用、光降解、生物降解是水体中MC减少的主要途径。沉积物往往是水体中污染物的汇,MC是否在其中有所累积,它在MC去除的过程中起何作用等问题,由于受到检测方法的限制,一直悬而未决。MC在沉积物中的积累、分布、迁移、转化过程等问题也缺乏系统的研究。为此本文对沉积物中MC的检测方法进行了研究,并对滇池沉积物样品进行了检测,主要内容和研究结果如下: 1.沉积物中微囊藻毒素的SPE-HPLC检测方法研究:高效液相色谱(HPLC)能对MC进行定性、定量检测,目前常被用于检测水体和藻体中的MC。本章通过加标回收的方法来探讨SPE-HPLC方法用于检测沉积物中MC的可行性,即:向滇池沉积物中加入一定量的MC配制成模拟样品,再从中提取出毒素,用SPE-HPLC方法检测提取液中毒素的含量,并用MC的回收率来评价方法的可行性。实验中对影响MC回收率的因素,如富集-洗脱条件、提取方式、提取液成分等进行了研究。结果表明,实验中所采用的C18小柱,在pH=7时,对水中MC的两种变体(MC-RR和MC-LR)均有较好的富集作用,用10ml含0.1%三氟乙酸(TFA)的甲醇溶液(V/V)能将MC洗脱下来,回收率分别为84.8%,100%。对不同提取方式、不同提取液和两种MC变体的提取效果进行比较,发现采用正丁醇:甲醇:水=5∶20∶75的提取液,用多次搅拌提取的方式效果相对较好,海埂区MC-RR、MC-LR回收率分别为12.9%,15.7%;马村湾MC-RR、MC-LR回收率分别为33.8%,26.4%;海东湾MC-RR、MC-LR回收率分别为35.5%,19.7%。用此方法对滇池沉积检测时,发现沉积物中存在微量MC(在检
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