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【目的】本研究利用鸡朊蛋白过表达DF-1细胞系，与正常DF-1细胞在增殖、粘附、侵袭和凋亡方面的比较，初步探究禽朊蛋白对DF-1细胞的影响；通过检测朊蛋白过表达DF-1细胞与正常DF-1细胞增殖相关蛋白Akt的表达量，并采用渥曼青霉素阻断增殖相关信号转导途径（PI3K/Akt途径），阐明朊蛋白过表达影响DF-1细胞的分子机制，进一步了解禽朊蛋白的生理功能，为研究禽源细胞肿瘤发生提供理论依据。【方法】（1）根据GenBank中鸡Akt和β-actin基因序列各设计一对引物，经过优化反应条件，建立针对ChAkt mRNA的反转录荧光定量PCR检测方法；将DF-1-PrP、DF-1-cont和DF-1细胞提取总RNA，以该法进行荧光定量PCR扩增，再进行统计分析。（2）在DF-1-PrP、DF-1-cont和DF-1细胞中加入不同浓度渥曼青霉素，作用一段时间后，利用细胞MTT法、流式细胞术、粘附实验和侵袭实验等方法检测朊蛋白与Akt对DF-1细胞增殖、粘附、侵袭和凋亡的影响，并利用实验室建立的PRNP SYBRGreenⅠ双标准曲线荧光定量PCR检测方法，检测在不同渥曼青霉素浓度下朊蛋白的表达量。【结果】（1）建立了β-actin和Akt的SYBR Green I荧光定量RT-PCR双标准曲线检测法，得到了最佳反应体系与条件。质粒pMD18-β-actin、pMD18-Akt的标准曲线分别为y＝－3.506x＋44.18、y＝－3.437x＋42.78，灵敏度为104。建立的ChAkt RT-PCR标准曲线具有特异的单个峰和良好的线性关系，能够对样品进行稳定可靠的检测。采用本方法检测DF-1-PrP和DF-1-count细胞系的Akt基因相对表达量，前者为1.6569×103，后者为2.2574×102，Akt基因在DF-1-PrP细胞中表达量显著高于DF-1-count细胞（p＜0.01），表明在DF-1细胞中Akt与PrPC的表达量正相关；此方法能够通过对Akt基因的转录量进行检测，进而评价鸡细胞的增殖能力。（2）细胞粘附、增殖和侵袭实验结果显示：各实验组的细胞粘附、增殖和侵袭活性均低于空白对照组细胞的活性；当渥曼青霉素终浓度低于20nmol/L时,其对细胞的粘附、增殖和侵袭抑制影响较小，而当其终浓度升高至50nmol/L时，细胞的粘附、增殖和侵袭活性的抑制明显增强（P＜0.01），并随着渥曼青霉素浓度的增加,这种抑制作用逐渐增强,并表现出量效关系。同时，由于PrPC的过表达，DF-1-PrP细胞在渥曼青霉素浓度低于50nmol/L时，表现出抵抗这种抑制作用，使得DF-1-PrP细胞获得抵抗渥曼青霉素的活性抑制能力；在渥曼青霉素作用下，3种DF-1细胞PrPC基因mRNA拷贝数检测显示，3种DF-1细胞PrPC的表达量均出现变化，随着渥曼青霉素浓度的提高，PrPC的表达量大致呈现出下降的趋势。【结论】（1）Akt基因的表达量与PRNP的表达量密切相关，提示ChPrPC可能参与了Akt的激活，并且Akt对PrPC可能存在反馈调节。（2）鸡PrPC参与或调节了DF-1细胞的粘附、增殖、凋亡与侵袭等生理过程，可促进DF-1细胞的粘附、增殖和侵袭，抑制DF-1细胞的凋亡。（3）加入渥曼青霉素（PI3K/Akt信号转导通路的抑制剂）后，可明显抑制DF-1细胞的粘附、增殖和侵袭，并促进DF-1细胞凋亡，且作用于药物浓度呈正相关。相比正常的DF-1细胞，DF-1-PrP细胞受到渥曼青霉素（浓度低于50nmol/L）的影响较小，这说明过表达的PrPC还可通过其他途径调节DF-1细胞的增殖、粘附和侵袭的能力。