ACE2在WKY和SHR大鼠中的表达及与高血压的关系

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肾素-血管紧张素系统(Renin Angiotensin System, RAS)在心血管功能(调节血压和血容量)、维持体液和电解质平衡、细胞生长、组织纤维化等方面都起着十分重要的作用。血管紧张素转换酶2(Angiotensin converting enzyme2, ACE2)是RAS系统新的调控因子,研究表明ACE2广泛参与了高血压、心衰竭、糖尿病、SARS.肝损伤等疾病的发生发展过程。ACE2作为疾病标志物和药物治疗的新靶点而倍受关注,但ACE2参与这些生理和病理过程中的作用机制还不是很清楚。本文选用自发性高血压大鼠(Spontaneously hypertensive rat, SHR)和与之匹配的正常WKY大鼠作为试验动物,研究ACE2及RAS系统其它几个关键调控因子在WKY和SHR大鼠心脏、肾脏、下丘脑和垂体中的表达,进一步探讨ACE2在高血压形成过程中的相互关系和作用。研究包括两个部分:1ACE,ACE2在WKY,SHR大鼠心脏和肾脏中的表达差异与高血压的关系目的通过观察WKY,SHR大鼠心,肾组织中ACE和ACE2表达的差异,探讨ACE与ACE2在自发性高血压大鼠高血压形成中的作用。方法14周龄雄性Wistar-京都种大鼠(WKY)和自发性高血压(SHR)大鼠各8只,体重300g左右,自由采食和饮水一周后用BSN-II多通道无创测压系统测定大鼠收缩压(SBP)、舒张压(SDP)和心率(HR)并称重。断头处死,采集血液、心脏和’肾脏组织。放免法测定血浆中Angll水平;Real-time PCR法比较WKY和SHR大鼠心、肾组织中ACE, AT1R,ACE2和MasR mRNA的表达水平;Western blot法检测WKY和SHR大鼠心、肾组织中ACE2的蛋白表达。结果SHR大鼠SBP和DBP均显著高于WKY大鼠(138.72±4.97VS191.75±4.06,P<0.01;101.68±3.96VS140.67±4.39,P<0.01);两组大鼠心率和体重无显著差异(P<0.05);SHR大鼠血浆中AngII水平显著升高(1.99±0.09VS2.60±0.08,P<0.05);与WKY大鼠相比,SHR大鼠心脏和肾脏中ACE mRNA表达均显著升高(P<0.05),ACE2mRNA和蛋白表达水平均显著下降(P<0.05);心脏和肾脏组织中ATlR和MasR的:nRNA表达没有显著性变化(P>0.05)。结论(1)ACE与ACE2表达失调是SHR大鼠高血压形成的主要原因之一,其机理可能与局部组织RAS系统中ACE-Angll-ATIR通路过度活跃,ACE2-Ang(1-7)-MasR通路相对不足有关(2)ACE与ACE2表达差异可能与大鼠遗传背景有关。2ACE,ACE2在WKY,SHR大鼠下丘脑和垂体中的表达差异与高血压的关系目的本研究上一章的研究发现ACE2在WKY,SHR大鼠心脏和肾脏组织中mRNA和蛋白水平上的表达均存在差异,但ACE2在下丘脑和垂体中的表达情况还不是很清楚,本章目的旨在研究ACE2在下丘脑-垂体轴的表达定位、代谢变化以及与垂体-下丘脑-肾上腺轴激素分泌之间的相互关系和可能的作用机制。方法14周龄雄性wistar-京都种大鼠(wKY)和自发性高血压(SHR)大鼠各8只,体重300g左右,自由采食和饮水一周后断头处死,采集血液、下丘脑和垂体组织。进行了如下实验:1)放免法测定血浆中CRH、ACTH、Ald和Angll水平;2)Real-time PCR(?)去比较wKY,SHR大鼠下丘脑和垂体中ACE、ATlR、ACE2和MasR mRNA的表达水平;3)Western blot检测wKY和SHR大鼠下丘脑ACE2的蛋白表达。结果SHR大鼠血浆中CRH、ACTH和Ald水平均显著低于wKY大鼠(P<0.05),与wSK大鼠相比分别减少了84%、31%和35%,而AngII含量升高了31%(p<0.05);与wKY大鼠相比,SHR大鼠下丘脑ACE mRNA的表达显著增加(P<0.05),而ACE2mRNA和蛋白的表达有下降的趋势(0.05<P<0.1),ACE mRNA/ACE2mRNA的比值显著提高(P<0.05);下丘脑ATlR和MasR mRNA的表达也有相应变化,但差异不显著(p>0.05)。两组大鼠垂体中ACE、ATlR、ACE2和MasR mRNA的表达没有显著性差异(P>0.05)。结论(1)首次证明大鼠下丘脑和垂体中有ACE2的表达;(2)下丘脑RAS系统参与了血压调控,以ACE-Angll-AT1R轴的活性占优势
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