富血小板血浆凝胶对前交叉韧带重建术后腱—骨界面愈合影响的形态学观察

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目的探讨富血小板血浆凝胶对前交叉韧带重建术后腱骨界面愈合的形态学影响方法术前8小时内采集并分离出新鲜的富血小板血浆。共48只4~6月龄新西兰白兔按1-48编号,随机分为A、B、C三组。以兔后肢右膝关节作为研究对象,趾长屈肌作为ACL移植物。A组兔将富血小板血浆凝胶注入ACL重建模型股骨道顶端间隙;B组兔注射生物蛋白胶;C组不做其他处理。分别在2周、4周、8周、12周四个时间点每组各处死4只兔,并进行解剖形态观察。取材制成石蜡切片并进行苏木素-伊红染色(Hematoxylin-Eosin Staining,HE)、甲苯胺蓝染色(ToluidineBlue Staining,TB)、Masson三色染色(Masson trichrome staining),进行组织形态学观察,并进行腱-骨界面各时间点成纤维细胞计数及组织形态学Buark评分,以比较各组前交叉韧带重建术后腱-骨界面愈合的情况。结果(1)①A组:术后2周腱-骨界面可见少量疏松结缔组织、少量成纤维细胞,移植肌腱与骨道分离;术后4周可见大量的疏松结缔组织、类软骨细胞、成纤维细胞及胶原纤维,并可见新生骨形成,腱-骨间隙已不清晰;术后8周可见大量类软骨细胞,出现纤维软骨带, Sharpey纤维集结,胶原纤维排列较规则;术后12周腱-骨间形成致密的纤维结缔组织,可见大量排列有序的Sharpey纤维,并且有纤维软骨、钙化软骨形成。②B、C组:术后2周腱-骨界面见少量疏松结缔组织,少量成纤维细胞,未见胶原纤维,同时腱-骨界面分离明显;术后4周腱-骨界面可见少量疏松结缔组织,散在分布的类软骨细胞和胶原纤维,但是未与骨道垂直排列;术后8周腱-骨界面为较多类软骨细胞及胶原纤维,Sharpey纤维散在分布;术后12周有较多排列无序的类软骨细胞出现,Sharpey纤维排列紊乱。(2)术后四个时间点对三组标本进行高倍镜下成纤维细胞计数,采用单向方差分析及SNK法检验,得出结论:A组与B组和A组与C组在四个时间点比较均有统计学意义(P<0.05),而B组与C组在四个时间点比较均无统计学意义。(3)高倍镜下对腱-骨界面纤维血管和Sharpey纤维进行组织形态学Buark评分,通过Wilcoxon秩和检验进行比较,得出结论:12周内A组与B组、A组与C组组Buark评分的差异有统计学意义(P<0.05),即A组组织形态学Buark评分较B、C组高。结论富血小板血浆(PRP)凝胶有利于前交叉韧带重建术后腱-骨界面的愈合。
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