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实验目的：研究人结肠癌细胞株HCT116在外源性基因CyPA（cyclophilin A）过表达的作用下，讨论肿瘤细胞HCT116对奥沙利铂药物的敏感性的影响，及高表达外源性CyPA后肿瘤细胞HCT116-CyPA周期分布的变化。实验方法：1.应用本实验室已建构的，含有完整CyPA基因序列的，并携带Myc标签基因的真核表达质粒pcmv-CyPA，采用脂质体瞬时转染HCT116肿瘤细胞。2.采用western blot的方法鉴定转染目的基因pcmv-CyPA、空载体pcmv后，转染后肿瘤细胞的CyPA蛋白表达水平。3.采用流式细胞仪法检测转染目的基因CyPA、空载体的肿瘤细胞的细胞周期分布。4.应用不同浓度梯度的奥沙利铂药物处理转染后的细胞,用四甲基偶氮唑盐(4,5-dimethylth iazoleo r2,5-diphenylte trazoilumb romid,MTT)法检测药物对转染目的基因CyPA及转染空载体pcmv的细胞的抑制率。5.在32μg/mL的奥沙利铂药物作用12h后，流式检测转染细胞的凋亡率的变化。实验结果：1.转染目的基因细胞HCT116-CyPA的CyPA表达水平较转染空载体细胞HCT116-pcmv细胞CyPA表达显著升高。2.与对照组HCT116-pcmv相比，实验组肿瘤细胞周期分布表现为，G1期细胞呈下降趋势，S期细胞呈上升趋势，G2细胞无明显变化，实验重复三次后，统计学分析数据发现目的基因实验组与对照组相比具有显著性差异（P <0.05）。3.在相同时间(12h、24h、36h)相同浓度（16μg/mL、32μg/mL、64μg/mL）的奥沙利铂药物作用浓度下,转染目的基因组HCT116-CyPA细胞较转染空载体组HCT116-pcmv的细胞成活数量更多，药物对细胞的抑制率更低（P<0.05）。作用48h后，转染目的基因组与转染空载体组均无明显差异（P>0.05）。4.在32μg/mL的奥沙利铂药物作用12小时后，HCT116-CyPA的凋亡率较转染空载体组细胞HCT116-pcmv的凋亡率明显降低（P<0.05）。实验结论:CyPA可影响肿瘤HCT116细胞周期的分布，低表达CyPA较高表达CyPA的细胞其细胞周期落后，CyPA过表达可以促进HCT116细胞周期由G1向S期的转变。MTT实验结果显示，CyPA高表达的细胞具有抵抗奥沙利铂药物促凋亡的作用，其药物抑制率较转染空载体组更低（P<0.05）。在后续的流式试验中，再次印证MTT实验结果。目的探讨胸腺瘤合并单纯红细胞再生障碍性贫血的治疗方法。方法对1例胸腺瘤切除活检后明确病理，8年后肿瘤复发，行化疗、免疫调治疗。结果患者术后复发后，行4周期化疗（具体方案为：多西他赛120mg+顺铂40mgd2-4），患者病程进展，出现并发症：红细胞再生障碍性贫血，经环孢素免疫抑制治疗，联合原化疗方案治疗后，患者红细胞数、血红蛋白回升，复查CT，患者疗效评价PR。治疗治疗耐受性较好。结论胸腺瘤(thymoma)是前纵隔最常见的前上纵隔肿瘤，单纯红细胞再生障碍性贫血是胸腺瘤的并发症之一，其诊断主要依赖影像学及血细胞检查，应与其他免疫性贫血性疾病相鉴别。患者行胸腺切除术后，术后8年肿瘤复发，后化疗4个周期病情进展出现纯红细胞再障。应用环孢素调节免疫治疗，并继续应用原方案化疗3个周期后，患者病情得到有效控制，并逆转原化疗方案耐药性。复查CT，疗效评价：PR。