益肾蠲痹法对强直性脊柱炎骨丢失调控的临床和实验研究

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目的强直性脊柱炎是一种临床上常见的炎性关节病,主要侵犯骶髂关节、髋关节和脊柱,并且可伴有关节外表现。骨量丢失是强直性脊柱炎最常见的一种并发症,在疾病早期即可发生骨量减少和骨质疏松,其发病率分别为21.67%和5%。目前,强直性脊柱炎的治疗主要以西医为主,西医则主要从抗炎的角度着手,不能有效控制骨量丢失,因此存在局限性。本研究通过探查益肾蠲痹汤对强直性脊柱炎骨丢失的影响,来评价其疗效,为强直性脊柱炎治疗开拓思路,提供新方法。第一部分 益肾蠲痹汤对强直性脊柱炎患者临床症状、指标的影响方法1.纳入强直性脊柱炎患者20例,随机分为对照组和治疗组2.分别于入组时、治疗6个月后评估患者疾病活动度BASDAI,测定超敏C-反应蛋白、红细胞沉降率、骨密度、Ⅰ型前胶原N端前肽和Ⅰ型胶原羧基端肽β特殊序列水平结果1.治疗组治疗后临床症状明显改善、红细胞沉降率和超敏C-反应蛋白水平下降、Ⅰ型前胶原N端前肽水平升高、Ⅰ型胶原羧基端肽β特殊序列水平降低,治疗前后变化差异均有统计学意义(P<0.05),骨密度改变不明显,治疗前后变化差异无统计学意义(P>0.05)。2.对照组治疗后临床症状明显改善、红细胞沉降率和超敏C-反应蛋白水平下降、Ⅰ型前胶原N端前肽水平降低、Ⅰ型胶原羧基端肽β特殊序列水平升高,治疗前后变化差异均有统计学意义(P<0.05),骨密度有不同程度的下降,腰椎骨密度下降较股骨颈明显,治疗前后变化差异有统计学意义(P<0.05)。3.两组均可降低红细胞沉降率、超敏C-反应蛋白水平,但组间比较无统计学意义(P>0.05);治疗组较对照组1型前胶原N端前肽、Ⅰ型胶原羧基端肽β特殊序列及骨密度改变明显,组间差异具有统计学意义(P<0.05)。结论1.益肾蠲痹汤可以明显改善患者骨代谢水平,减少骨量丢失,维持骨密度稳定,从而降低患者骨折风险,是其发挥治疗强直性脊柱炎效果的重要机制之一2.益肾蠲痹汤治疗强直性脊柱炎与对照组比较,抗炎作用优势不明显,有待进一步扩大样本进一步观察研究。第二部分 益肾蠲痹汤含药血清对OPG/RANKL/RANK信号轴的影响方法1.制备益肾蠲痹汤、含药血清、骨片2.分离、鉴定成骨细胞和破骨细胞3.将培养的成骨细胞和破骨细胞分组:分别为对照组(5%FBS+0%含药血清+20%不含药血清),益肾蠲痹汤小剂量(5%FBS+5%含药血清+15%不含药血清)、中剂量(5%FBS+10%含药血清+10%不含药血清)和大剂量(5%FBS+20%含药血清+0%不含药血清)含药血清组。通过Western blot方法检测不通条件处理下成骨细胞OPG/RANKL、破骨细胞RANK的表达量。结果1.益肾蠲痹汤含药血清处理后成骨细胞OPG表达上调,RANKL表达下调,OPG表达水平与含药血清浓度呈正相关,RANKL表达水平与含药血清浓度呈负相关。处理后破骨细胞RANK表达下调,RANK表达水平与含药血清浓度呈负相关。结论1.益肾蠲痹汤含药血清可以有效调控OPG/RANKL/RANK信号轴的表达,促进OPG的表达,抑制RANKL与RANK的表达,从而抑制破骨细胞活性,减少骨量丢失。2.益肾蠲痹汤含药血清调控OPG/RANKL/RANK信号轴的程度与含药血清浓度有关,OPG表达水平与含药血清浓度呈正相关,RANKL、RANK表达水平与含药血清浓度呈负相关,提示益肾蠲痹汤抗骨丢失作用与药用药剂量呈正相关。
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