莱菔硫烷抑制人小细胞肺癌NCI-H446细胞增殖、侵袭以及MMP-9的表达与活性

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目的探讨莱菔硫烷(sulforaphane, SFN)对人小细胞肺癌NCI-H446细胞增殖侵袭以及基质金属蛋白酶(matrix metalloproteinase, MMP)-9表达的影响,从而为探索有效的肺癌治疗药物提供参考方法体外培养NCI-H446细胞,用0.25,50,100μM SFN处理24~72h后,MTT法检测细胞的增殖和情况和对纤维连结蛋白黏附的影响;Transwell法检测SFN处理对NCI-H446细胞迁移、侵袭的改变情况。RT-PCR检测SFN处理前后MMP-9mRNA的表达,并通过明胶酶谱实验检测MMP-9的酶活性变化。结果1.MTT结果显示,25、50、100μM SFN对NCI-H446细胞有明显抑制作用,生长抑制率随SFN作用浓度的升高和作用时间延长而升高。其中72h后,25、50、100μM SFN对NCI-H446细胞的抑制率分别为11.1%,25.2%和44.6%。2.无SFN的对照组的细胞在包被有细胞外基质成分的培养板上能正常生长,而在经SFN处理的各组当中,细胞伸展不完全,当SFN浓度达到100μM时,细胞正常形态已经改变,贴壁细胞极少。经MTT法检测,不同浓度的SFN均能明显降低NCI-H446细胞在细胞外基质的黏附,且随SFN浓度增大,抑制作用增强。3.SFN对NCI-H446细胞有明显的侵袭抑制作用,随SFN剂量的增加侵袭抑制作用明显增强。25、50、100μM SFN作用24h,NCI-H446穿膜细胞数为(85.4±4.41)%、(68.8±6.84)%和(50.5±4.26)%。4. RT-PCR结果显示,不同浓度SFN作用NCI-H446细胞后,MMP-9的mRNA表达逐渐降低,呈剂量依赖性。5.明胶酶谱实验显示, SFN处理也能明显降低NCI-H446细胞MMP-9的活性。结论1.SFN能抑制NCI-H446细胞生长增殖,并降低其与细胞外基质的黏附能力;2.SFN也能有效抑制NCI-H446细胞的迁移侵袭3.SFN对NCI-H446细胞迁移侵袭的抑制作用可能与降低MMP-9的表达水平,下调酶活性有关。
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