目的:1、基于癌干细胞的耐药性,通过CTX体内干预连续传代的方法富集肾上腺皮质癌干细胞并评估其效率,为寻找肾上腺皮质癌干细胞提供更多选择的途径。2、探讨肾上腺皮质癌干细胞相关标志物在CTX富集获得的各代细胞中的表达水平,以寻找肾上腺皮质癌干细胞的特异性表面标志物,为今后分离癌干细胞提供实验基础。方法:1、将人肾上腺皮质癌SW-13细胞株种植于裸鼠皮下,形成的异种移植瘤在裸鼠体内连续传代,同时给予化疗药CTX富集肾上腺皮质癌干细胞。2、评估CTX富集癌干细胞的效率:运用悬浮球实验检测所富集到的细胞的自我更新能力,单细胞及平板克隆形成实验检测其克隆形成能力,MTT法检测其增殖的能力。3、流式细胞法分析所富集到的三代细胞癌干细胞相关标志物CD133、ABCG2和CXCR4的表达水平。结果:1、CTX富集得到的三代细胞及对照组细胞的单细胞克隆形成率分别为(58.67±2.31)%、(75.00±3.61)%、(79.00±2.00)%和(43.33±3.06)%,平板克隆形成率分别为(349.67±12.99)‰、(449.33±42.70)‰、(618.67±24.58)‰和(196.33±24.46)‰,悬浮球形成率分别为(1.52±0.29)%、(4.17±0.41)%、(5.41±0.90)%和(0.37±0.11)%,经CTX富集的三代细胞在单细胞克隆形成率、平板克隆形成率、悬浮球形成率等均高于对照组(P<0.05);细胞生长曲线提示,经CTX富集的三代细胞增殖能力强于对照组细胞(P<0.05)。2、在CTX富集获得的三代细胞与对照组细胞中,CD133为阴性表达;ABCG2 的表达率分别为(98.03±1.35)%、(92.86±5.33)%、(89.40±5.27)%和(87.09±12.34)%,组间两两比较(P>0.05);CXCR4的表达率分别为(22.77±1.11)%、(40.93±2.33)%、(87.41±3.78)%和(27.85±12.71)%,第三代细胞CXCR4的表达率高于对照组(P<0.05)。结论:1、CTX干预后连续传代法可以提高癌干细胞在肾上腺皮质癌中的比例。2、CXCR4在第三代细胞中高表达,其可作为肾上腺皮质癌干细胞分选的候选指标。