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目的:探讨ICA（Icariin）对IL-1β（Interleukin-1β）诱导的软骨细胞的影响是否与自噬有关,并通过敲低SW1353（Human chondrosarcoma cell）细胞的人自噬启动蛋白1（unc-51-like kinase 1,ULK1）,探讨 ICA 对 IL-1β刺激 SW1353 细胞的保护作用是否与磷脂酰肌醇-3 激酶（Phosphatidylinositol 3-kinase,PI3K）/蛋白激酶 B（protein kinase B,Akt）/哺乳动物雷帕霉素靶蛋白（Mammalian target of rapamycin,mTOR）/ULKI通路相关。方法:1、培养SW1353细胞,显微镜确认具体的形态,CCK-8法测试多种浓度与时间节点的细胞活力,确定ICA和IL-1β的最佳浓度和最佳时间;2、IL-1β造模:采用20ng/mL的IL-1β体外诱导SW1353细胞,Western blot测定胞外基质基质金属蛋白酶（Matrix metalloproteinases,MMP3、MMP13）和二型胶原（Collagen Ⅱ）蛋白,qRT PCR检测细胞外基质MMP3、Collagen Ⅱ、蛋白聚糖（Aggrecan）的 mRNA;3、ICA减少软骨细胞的炎症,增加自噬:采用40μM的ICA预处理SW1353细胞2h,采用 20ng/mL 的 IL-1β刺激 48h。Western blot 测定 MMP3、Collagen Ⅱ、微管相关蛋白轻链3（Microtubule-associated protein3,LC3 Ⅱ/Ⅰ）、酵母自噬相关基因6同源物（Becn1 gene,Beclin1）、选择性自噬接头蛋白（Sequestosome1,p62/SQSTM1）的表达;qRT PCR的方法测定MMP3、Collagen Ⅱ、Beclin1的mRNA;免疫荧光法检测Collagen Ⅱ和Aggrecan;4、敲低ULK1基因,淫羊藿苷对软骨细胞炎症、自噬、PI3K/Akt/mTOR/ULK1信号通路的影响:敲低SW1353细胞的ULK1基因,40μM的ICA预处理shRNA-ULK1病毒感染的SW1353细胞2h,20ng/mL的IL-1β刺激48h,采用Western blot检测MMP3、Collagen Ⅱ、LC3 Ⅱ/Ⅰ、Beclin1、p62、ULK1、p-PI3K、PI3K、p-AKT、AKT、p-mTOR、mTOR 蛋白。结果:1、传代培养的SW1353细胞形态近似梭形,细胞胞浆丰富,呈聚集成团生长。C CK8法检测IL-1β的最佳浓度和时间分别为20ng/mL和48h,ICA的最佳浓度和时间分别为40μM和48h;2、成功建立细胞OA模型:Western Bolt结果显示,与Control组相比,模型组Collagen Ⅱ蛋白明显降低（P＜0.05）,MMP3和MMP13明显升高（P＜0.05）;RT-PCR结果显示,和Control组相比,模型组Collagen Ⅱ与Aggrecan mRNA明显降低（P＜0.05）,MMP3 mRNA 明显升高（P＜0.05）;3、ICA减轻OA的炎症,增加自噬:Western Bolt结果显示,和Control组相比,IL-1β组 MMP3、p62 蛋白明显升高（P＜0.05）,Collagen Ⅱ、LC3 Ⅱ/Ⅰ、Beclin1 蛋白明显降低（P＜0.05）,ICA预处理之后表现出相反的结果。RT-PCR检测结果显示,与 Control 组相比,IL-1β组 SW1353 中 Beclin1 与 Collagen Ⅱ mRNA 表达显著减少（P＜0.05）,MMP3 mRNA 明显升高（P＜0.05）,ICA 预处理增加 Beclin1、CollagenⅡ mRNA表达（P＜0.05）,减少MMP3 mRNA的表达（P＜0.05）。免疫荧光结果显示,与Control组相比,IL-1β组细胞内Collagen Ⅱ和Aggrecan蛋白的荧光强度显著降低（P＜0.05）,ICA预处理使细胞内Collagen和Aggrecan蛋白的荧光强度显著升高（P＜0.05）;4、敲低SW1353细胞的ULK1基因,Western Bolt结果显示,和IL-1β组相比,ICA+IL-1β组 SW1353 中 LC3 Ⅱ/Ⅰ、Beclin1、Collagen Ⅱ、ULK1 蛋白显著增加（P＜0.05）,MMP3、p62、p-PI3K/PI3K、p-AKT/AKT、p-mTOR/mTOR 蛋白显著降低（P＜0.05）;与 ICA+IL-1β+shRNA-NC 相比,ICA+IL-1β+shRNA-ULK1 组 SW1353中 LC3 Ⅱ/Ⅰ、Beclin1、Collagen Ⅱ、ULK1 蛋白显著减少（P＜0.05）,MMP3、p62、p-PI3K/PI3K、p-AKT/AKT、p-mTOR/mTOR 蛋白显著增加（P＜0.05）;RT-PCR 结果显示,与IL-1β组相比,ICA+IL-1β组SW1353中Aggrecan mRNA蛋白显著增加（P＜0.05）,MMP3 mRNA 显著减少（P＜0.05）;与 ICA+IL-1β+shRNA-NC 相比,ICA+IL-1 β+shRNA-ULK1 组 SW1353 中 Aggrecan mRNA 显著减少（P＜0.05）,MMP3 mRNA 显著增加（P＜0.05）。结论:ICA逆转IL-1β诱导的SW1353炎症,与抑制PI3K/Akt/mTOR通路有关