大鼠中枢神经系统TPH2的表达差异对射精调控的影响及意义

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研究背景和目的:早泄是男性众多性功能障碍中很常见的一种。目前早泄的病因和发生机制尚不清楚,但是主流的观点认为早泄的发生与中枢5-羟色胺(5-hydroxytryptamine,5-HT)传递障碍和/或5-HT受体功能障碍有关。5-HT作为大脑中枢中重要的神经递质,可以刺激射精中枢,从而持续发挥抑制射精的作用。有研究证据表明,中枢系统中5-HT的合成代谢会影响其在突触中的水平。那么如果5-HT合成紊乱,可能会影响5-HT在射精调节中的作用。目前,色氨酸羟化酶-2(Tryptophan Hydroxylase-2,TPH2)被认为是中枢神经系统中5-HT合成的限速酶,而且TPH2也已被证实是大脑中枢中特异性表达的酶,所以中枢中TPH2的表达水平会直接影响突触间隙中5-HT的含量。目前对于射精调控的研究主要集中在5-HT的传递及其受体的功能方面,很少有研究证明中枢神经中TPH2的表达水平与射精调节的关系,所以本研究的目的在于探讨中枢脑组织中TPH2表达水平的变化是否与射精调控有关。材料和方法:选取SD雌雄大鼠各105,待大鼠适应新环境后,雄鼠与发情良好的雌鼠进行6周的交配实验,并且记录雄性大鼠的性行为学特征。根据观察记录到的雄性大鼠的射精频率(Ejaculation Frequency,EF),将雄性大鼠分别分成三组:“快速射精组”、“正常射精组”和“延迟射精组”,从而构建大鼠早泄模型。用酶联免疫吸附法(Enzyme-linked Immunosorbent Assay,ELISA)分析每一组大鼠脑组织中5-HT的含量,蛋白质印迹法(Western Blot,WB)分析各组大鼠脑组织中TPH2的表达情况,然后再使用相关性分析来验证射精频率、射精潜伏期等性行为学特征与大鼠脑组织中TPH2表达的关系(p<0.05),最后用免疫组化法(IHC)分析TPH2在脑组织中的定位表达情况。以同样的方法再筛选出一批快速射精大鼠,然后将快速射精组大鼠随机分成两组,一组使用达泊西汀处理作为药物干预组,另一组使用0.9%的Na Cl注射液处理来作为空白对照组。将药物干预组大鼠和0.9%的Na Cl溶液处理的对照组大鼠分别与雌性大鼠进行交配实验,记录两组雄性大鼠的性行为学特征。用ELISA法分析这两组大鼠脑组织中5-HT的含量,然后再通过WB和IHC实验来分析TPH2在这两组大鼠大脑中枢中的表达情况是否存在差异。结果:ELISA和Western Blot结果显示快速射精组大鼠脑组织中5-HT浓度和TPH2的表达水平最低,而在延迟射精组表达最高。并且通过相关性分析表明,脑组织中TPH2表达水平与射精潜伏期呈正相关(r=0.8633,P<0.0001),与射精频率呈负相关(r=-0.874,P<0.001)。免疫组化结果显示TPH2在各组大鼠大脑的前额叶皮质、海马、纹状体区域均存在表达。另外,快速射精组大鼠给予达泊西汀处理后,其脑组织中5-HT的含量显著增加,而且大脑中枢中TPH2的表达也出现明显的上调。结论:大脑中枢内TPH2表达水平的变化可能会影响射精调控的过程。TPH2在相关脑区内表达的减少会促进射精。此外,达泊西汀延长射精的作用可能与上调脑内TPH2的表达有关。
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