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目的:本课题首先检测外周T细胞淋巴瘤-非特指型(peripheral T-cell lymphoma-unspecified,PTCL-U)组织中HDAC2蛋白的表达水平,分析HDAC2表达水平与患者不同临床特征及预后的关系;然后探讨HDAC抑制剂西达本胺(Chidamide,CS055)对PTCL细胞系Jurkat细胞的影响,以及联合多柔比星对Jurkat细胞的作用及相关分子机制。期望为PTCL临床治疗提供新的思路,以改善PTCL患者的预后。方法:1.采用免疫组化染色法检测37例PTCL-U患者的肿瘤组织中HDAC2蛋白的表达情况,并分析HDAC2表达水平与PTCL-U患者不同临床特征及预后的关系。2.采用MTS/PMS法检测CS055对Jurkat细胞增殖的影响,以及联合多柔比星对Jurkat细胞增殖的影响,最后,药物协同效应由Compu Syn软件分析。3.PI染色后经流式细胞仪检测CS055单药对Jurkat细胞周期的影响。4.Annexin V/PI双染色后经流式细胞仪检测CS055单药及联合多柔比星对Jurkat细胞凋亡的影响。5.通过罗丹明123(Rhomdamine123,Rho123)染色法检测CS055单药及联合多柔比星对Jurkat细胞线粒体膜电位的影响。6.CS055和多柔比星协同机制采用Western blotting方法分析。结果:1.免疫组化染色结果显示,HDAC2蛋白在PTCL-U组织中表达水平较高,其中高表达率为70.3%(26/37)。2.统计学分析HDAC2表达与患者临床特征之间的关系,发现HDAC2高表达者常伴血清乳酸脱氢酶(lactate dehydrogenase,LDH)水平升高和临床分期较晚(P<0.05)。而HDAC2表达水平与患者年龄、性别、B症状、骨髓受累、IPI评分、β2微球蛋白及Ki-67均无相关性(P>0.05)。3.相比HDAC2低表达者,HDAC2高表达者的总生存期(overall survival,OS)明显缩短,差异有统计学意义(32.1 vs 16.0,P=0.032)。4.单因素分析显示HDAC2高表达是影响PTCL-U患者预后的不良因素(P=0.032),但多因素分析显示HDAC2高表达尚不能作为PTCL-U患者的独立预后因子(P=0.722)。5.西达本胺单独作用于Jurkat细胞可产生剂量和时间依赖性细胞生长抑制作用;西达本胺联合多柔比星对Jurkat细胞的增殖具有协同抑制效应。6.PI染色后流式细胞仪检测结果显示,西达本胺可诱导Jurkat细胞G0/G1期呈剂量依赖性阻滞。多柔比星可诱导Jurkat细胞G2/M期阻滞,所以,两者对细胞周期阻滞无协同作用。7.Annexin V/PI双染色后流式细胞仪检测结果显示,西达本胺可诱导Jurkat细胞凋亡,联合多柔比星后凋亡率明显增加,差异有统计学意义(P<0.01)。8.罗丹明123染色后,发现西达本胺可诱导Jurkat细胞线粒体膜电位降低,联合多柔比星后,线粒体膜电位明显降低。9.Western blotting检测结果显示,西达本胺可诱导Jurkat细胞组蛋白H3乙酰化水平升高,而对HDAC2表达量无明显影响,西达本胺联合多柔比星作用于Jurkat细胞可上调γH2AX的表达,下调Bcl-2的表达和激活Caspase-3、Caspase-9和PARP。结论:1.HDAC2在PTCL-U组织中显著高表达,且HDAC2高表达者常伴LDH水平升高和临床分期较晚。另外,HDAC2高表达者OS明显缩短。单因素分析显示HDAC2高表达是影响PTCL-U患者预后的不良因素(P=0.032),但多因素分析显示HDAC2高表达尚不能作为PTCL-U患者的独立预后因子(P=0.722)。2.西达本胺可抑制Jurkat细胞增殖、诱导G0/G1期阻滞及细胞凋亡。3.西达本胺联合多柔比星抑制Jurkat细胞增殖和诱导细胞凋亡的作用有协同性。4.西达本胺与多柔比星联合应用抑制Jurkat细胞增殖和诱导其凋亡的机制可能与线粒体凋亡途径被激活及DNA损伤增强有关。