论文部分内容阅读
目的探讨姜黄素对肺纤维化大鼠肺组织中Bcl-xl、Bax、casepase-3的影响及其在肺纤维化中的治疗作用。方法选取SD大鼠40只，体重180±10克，随机分为四组：假手术组（A组），模型组（B组），强的松组（C组），姜黄素组（D组），每组10只。B、C、D组制作成肺纤维化模型，采用一次性气管内注射博莱霉素（bleomycin,BLM）（5mg/kg）方法造模，假手术组注射等体积生理盐水。各组均于造模后第二天起开始给药，C组每日给予醋酸强的松混悬液（0.56mg/kg）灌胃，D组每天给予姜黄素混悬液灌胃，混悬液为姜黄素（200mg/kg）溶于0.5％羧甲基纤维素钠溶液配制而成，A照组及B组每日分别给予等体积的生理盐水灌胃。各组大鼠均于实验第28d称重后处死，留取肺组织，用于形态学观察及组织匀浆制备。1、制备HE染色切片，光镜下观察肺组织病理形态学改变。2、通过Western blot方法检测肺组织内凋亡相关基因Bcl-xl，Bax，caspase-3所调控的蛋白含量的变化。3、通过RT-PCR方法检测肺组织内凋亡相关基因Bcl-xl，Bax的基因表达含量的变化，结果1、肺纤维化大鼠的一般情况：A组大鼠体重持续性正常增长；B组大鼠体重增长缓慢；C组、D组大鼠体重持续性增长，但较A组增长缓慢，28d时B组与A组比较，差异有显著统计学意义（P＜0.01）；C、D组与B组比较，差异有统计学意义（P＜0.05）。2、姜黄素对大鼠肺部整体及肺系数的影响：A组双肺表面呈粉红色，表面光滑，弹性良好；B组双肺苍白，体积减小，质地较硬，出现小结节，肺部表面可见纤维条索状改变；C、D组双肺外观病理学变化明显好于B组，肺部呈暗粉色，表面未见结节形成，质地较软，弹性可。A组大鼠肺系数为5.87±0.28,B组10.23±1.02，C组7.12±0.41，D组7.98±0.33。B组大鼠肺系数明显升高，与其余各组比较差异均有统计学意义（P＜0.05）。3、肺纤维化过程中肺组织病理结构改变：A组肺部未出现病理形态学改变，肺泡及肺泡壁结构均正常；B组大鼠出现病理结构变化，表现为肺泡壁增厚，部分肺泡壁断裂不完整，肺间隔增厚，镜下可见成纤维细胞，细胞呈条索样分布，肺间质纤维化瘢痕明显存在，部分毛细血管腔可见堵塞现象；C、D组大鼠肺泡壁稍厚于A组，未见断裂肺泡壁，镜下未见肺间质纤维化瘢痕形成。4、姜黄素对肺组织内Bcl-xl、Bax、caspase-3蛋白表达的影响：与A组比较，B组大鼠肺组织内各因子蛋白含量升高，差异具有显著统计学差异（P＜0.01）；与B组比较，C组、D组大鼠体内各组蛋白含量下降，差异具有统计学意义（P＜0.05）；C组与D组的蛋白表达相比较可见，两者无统计学差异（P＞0.05）。5、姜黄素对大鼠肺组织内Bcl-xl、Bax基因表达的影响：与A组比较，B组大鼠肺组织内Bcl-xl、Bax基因含量升高，差异具有显著统计学差异（P＜0.01），与B组比较，C组、D组大鼠体内Bcl-xl、Bax基因含量下降，差异具有统计学意义（P＜0.05）；C组与D组比较，两者无统计学差异（P＞0.05）。结论1、在博莱霉素诱导的肺纤维化大鼠肺组织内，Bcl-xl、Bax、caspase-3基因及蛋白均存在异常表达现象，肺纤维化疾病的形成可能与这些凋亡相关因子异常表达有关。2、姜黄素对肺纤维化大鼠具有的治疗作用，可以延缓病情发展，改善大鼠生存质量，姜黄素可能通过减少Bax/Bcl-xl的表达，引起caspase-3蛋白表达下降，减少肺组织内异常的细胞凋亡活动，延缓肺纤维化的疾病进展。3、姜黄素在对肺纤维化抗细胞凋亡方面的治疗作用上与醋酸强的松片具有相似的疗效。