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本研究分为两部分：
第一部分：周期型马来丝虫热休克蛋白70基因的克隆和序列分析。
研究目的：克隆周期型马来丝虫热休克蛋白70(HSP70)基因，并进行序列测定，为该基因的原核表达及进一步研究打下基础。
研究方法：从周期型马来丝虫虫体中抽提总RNA，以mRNA为模板，采用RT-PCR法体外扩增周期型马来丝虫热休克蛋白70基因，扩增产物进行EcoRⅠ酶切初步鉴定后，将HSP70基因与克隆载体pGEM-T经T-A连接构建重组质粒pGEM-T-HSP70，并经测序验证。
研究结果：克隆的HSP70基因片段与预期大小相符，对其进行EcoRⅠ酶切，酶切片段大小亦与预期结果相符。HSP70与pGEM-T行T-A连接所构建的重组质粒pGEM-T-HSP70，其测序结果与报道的结果相同。
研究结论：成功地体外扩增了周期型马来丝虫HSP70基因；成功地构建了重组质粒pGEM-T-HSP70，为进一步进行HSP70基因表达奠定了良好的基础。
第二部分：周期型马来丝虫HSP70基因在大肠杆菌中的表达和表达产物的SDS-PAGE分析。
研究目的：马来丝虫HSP70基因，在GeneBank的序列数据库上的登录号为M68933，它有2094bp的完整开放读码框架(ORF)，编码由698个氨基酸组成的分子量70kDa的蛋白。本研究拟在大肠杆菌宿主系统中表达周期型马来丝虫HSP70基因，并进行表达蛋白的SDS-PAGE分析。
研究方法：以重组质粒pGEM-T-HSP70为模板，根据报道的HSP70基因序列设计合成一对引物，用PCR法扩增HSP70基因(包括完整开放读码框架片段及其上下游序列共长2198bp)，PCR产物定向插入原核表达载体pGEM-4T-3中，构建的重组质粒pGEM-4T-3-HSP70经双酶切鉴定。将重组质粒转化大肠杆菌BL21(DE3)，用IPTG诱导GST.Tag融合蛋白的表达，经SDS-PAGE分析并经凝胶图像分析确定目的蛋白的表达水平。
研究结果：重组表达质粒pGEX-4T-3-HSP70全长约7.2Kb，经双酶切后应得到长度为4968bp的载体和2198bp的目的基因两个片段，1％琼脂糖凝胶电泳显示结果同预期完全相符，而pGEX-4T-3质粒酶切后无2198bp片段产生。HSP70分子量为70kDa，质粒pGEX-4T-3的融合部分(GST.Tag)表达产物的分子量约为26kDa，重组质粒pGEX-4T-3-HSP70表达产物的预期分子量约为100kDa。将重组质粒转化BL-21(DE3)菌，经IPTG诱导表达，菌体蛋白的SDS-PAGE图谱显示，诱导组出现特异性蛋白表达条带，其分子量约100kDa，与预计大小相同。目的蛋白占菌体总蛋白的12％左右。
研究结论：成功地构建了重组原核表达载体pGEX-4T-3-HSP70；周期型马来丝虫HSP70基因可在大肠杆菌中稳定表达。本研究为制备和纯化表达蛋白及制备丝虫疫苗奠定了基础。