糖基化是蛋白翻译后修饰中最常见的形式之一,发挥着重要的生物学功能。糖蛋白及糖肽的分离、富集是研究分析糖蛋白/糖肽结构的关键。血浆中有超过50%的蛋白发生糖基化,血浆糖蛋白的变化与疾病的发生发展有密切关系。白血病是一种恶性血液系统疾病,研究白血病患者在治疗不同阶段血浆糖蛋白/糖肽的变化可为治疗白血病疗效检测及预后评价提供实验依据。本研究建立了一种快速、高效而经济的GA-ziptip糖肽富集方法,该方法可以富集不同糖链结构类型的糖肽。在GA-ziptip方法基础上又建立了GA自制色谱柱富集分离糖肽,实现了HPLC-ESI-FTICR-MS在线联用及半自动化。实验中用多种凝集素亲和层析富集白血病患者及正常人血浆糖蛋白,经二维凝胶电泳进行分离,对比白血病患者与正常人血浆糖蛋白凝胶图谱发现了与疾病变化相关的触珠蛋白-p链。利用建立的糖肽富集方法,分析了二维凝胶电泳分离出的触珠蛋白-p链各亚型糖链结构,并比较了白血病患者与正常人以及白血病患者治疗不同阶段的糖链结构变化。结果显示,白血病患者血浆触珠蛋白-β链的糖链唾液酸化程度升高,随治疗情况好转,糖链唾液酸化低于术前水平,提示糖链的唾液酸化与疾病过程及预后相关联。触珠蛋白-p链及其所连接的糖链可作为白血病治疗的疗程监测、疗效评价及预后评估的重要候选标志物。实验建立的离线及在线质谱检测糖肽方法为糖肽结构研究提供了实验基础。