动物胶类药材是以动物的皮、骨、甲、角等经熬制而成的一类中药材,是传统滋补性中药,药用历史悠久。目前,动物胶类药材的质量评价仍然主要依靠传统的生药学鉴别等方法,经验依赖性强、准确度较低。因此,本文针对动物胶剂成分复杂,缺乏安全、有效、可控的标准体系的现状,结合中药产业化、现代化的要求,运用现代分析技术,对东阿阿胶、东阿镇阿胶、龟甲胶、鹿角胶的质量控制技术进行了研究,并建立了四种胶剂的脂溶性成分HPLC指纹图谱。本研究首次对以阿胶为代表的药用动物胶剂脂溶性成分进行了指纹图谱的研究,结合系统聚类和相似度分析对胶剂药材质量进行了评价。此外,对伪品阿胶也进行了研究,从而为阿胶的真伪鉴别提供了稳定、可行的方法。采用高效液相色谱法研究并建立东阿阿胶、东阿镇阿胶、龟甲胶、鹿角胶脂溶性成分的指纹图谱,为药用动物胶质量控制提供有效的方法。本实验采用三相静态萃取方法制备样品,以水-乙腈为流动相进行二元梯度洗脱,检测波长为205nm,和190～400nm全波长扫描;分析时间为60min;柱温25℃;色谱柱为SHIMADZU VP-ODS(4.6mm i.d.×250mm,5μm)。实验共得到东阿阿胶主要共有峰19个,东阿镇阿胶主要共有峰18个,龟甲胶主要共有峰20个,鹿角胶主要共有峰17个。相似度计算结果显示同种胶剂不同批号样品间的相似度分别大于0.95、0.93、0.99、0.95,说明四种胶剂指纹图谱均有良好的重现性。本实验在阿胶脂溶性成分HPLC指纹图谱的基础上,结合相似度分析、聚类分析,有针对性的对10批正品东阿阿胶及10批伪品东阿阿胶进行了鉴别研究。相似度分析结果显示,10批伪品东阿阿胶与正品东阿阿胶对照图谱的相似度在0.48～0.82之间;聚类分析结果显示,10批东阿阿胶正品聚为一类,表明10批东阿阿胶的HPLC指纹图谱具有一致性及稳定性;10批东阿阿胶伪品则聚为两类。同时采用HPLC-MS对阿胶、龟甲胶、鹿角胶中具有鉴别意义的成分进行了初步的定性,为阿胶的鉴别及质量控制提供了依据。为确保本实验所建立的指纹图谱的普遍适用,按国家药典液相色谱耐受性考察的要求,分别考察了流动相比例、流动相流速、柱温、不同厂家或同一厂家不同批号同类型色谱柱。实验结果显示,流动相比例梯度在梯度准确度±3%的范围内、流速在±5%的范围内、温度在10～30℃内变化,色谱图共有峰相对保留时间及相对峰面积的RSD值分别小于2.0%、6.0%,相似度计算结果皆大于0.99。实验考察了五根来自四个不同厂家的色谱柱,不同色谱柱采集的谱图共有峰相对保留时间及相对峰面积的RSD值分别小于2.0%、6.0%,相似度大于0.99。充分说明了本实验所建立的指纹图谱具有良好的耐受性,为该方法用于常规检验提供了依据。本研究建立了动物胶类药材综合质量评价方法,为其质量标准的确立提供了参考。同时,建立了东阿阿胶的真伪鉴别方法,为东阿阿胶的鉴别提供了科学、稳定的方法。