【摘 要】
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“炎症”与“癌症”这两个词对现在的社会公众早已不再陌生,炎症是指机体在受到外邪攻击时引起组织、细胞等受到损伤而做出的反应,而癌症则是对所有恶性肿瘤的一个总称。近来诸多研究指出某些肿瘤的发生前或者发展时常常伴随有慢性炎症的产生,而慢性炎症的恶性转化则是癌症发生发展的一大重要环节。单面针（Zanthoxylum dissitum Hemsl.）为芸香科花椒属植物,其性味辛、苦、温,归肝、胃经,虽未入药
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“炎症”与“癌症”这两个词对现在的社会公众早已不再陌生,炎症是指机体在受到外邪攻击时引起组织、细胞等受到损伤而做出的反应,而癌症则是对所有恶性肿瘤的一个总称。近来诸多研究指出某些肿瘤的发生前或者发展时常常伴随有慢性炎症的产生,而慢性炎症的恶性转化则是癌症发生发展的一大重要环节。单面针（Zanthoxylum dissitum Hemsl.）为芸香科花椒属植物,其性味辛、苦、温,归肝、胃经,虽未入药典且长久以来被视作两面针的伪劣替代品,但因其在民间具有较悠长的用药历史,且在国家中药保护复方——妇科千金片中协力发挥抗炎效果,故而具有较为广泛的推广和临床药用价值。然而,目前对单面针的研究较少,而对单面针茎在“炎-癌”方面的研究更是未见报道。故本实验拟在课题组前期研究及文献查阅的基础上,对单面针茎中的生物碱进行提取、富集和纯化得到单面针茎总生物碱;以70%乙醇对单面针茎进行回流提取得,并以系统溶剂萃取法得到氯仿、乙酸乙酯、正丁醇共三个极性部位,利用微孔比浊法对单面针茎总生物碱及各极性部位进行抗菌活性的测定;建立LPS刺激巨噬细胞RAW264.7的炎症模型以及肝癌Hep G2、乳腺癌MCF-7和胃癌BGC-803三种癌细胞为研究对象,尝试探究单面针调控“炎-癌”的物质基础;利用实验室常规的柱层析并结合结晶等纯化操作对单面针茎中的化合物进行分离,且利用核磁等技术对其中20个化合物进行结构鉴定。结果如下。1.通过微孔比浊法对单面针茎总生物碱及各极性部位进行抗菌活性测定,结果显示,所有样品对本实验所选用的实验菌株均有较好的抗菌活性,且普遍对革兰氏阳性菌的抗菌效果更好。2.利用CCK8法检测单面针茎总生物碱、各极性部位及部分单体化合物对小鼠巨噬细胞RAW264.7的细胞增殖毒性,结果显示各样品在所选浓度范围内对巨噬细胞均无细胞毒性。3.采用Griess法测定单面针茎总生物碱、各极性部位及部分单体化合物对LPS诱导刺激巨噬细胞RAW264.7产生所产生的NO清除效果,结果显示:与模型组相比本实验中的各样品组在62.5~250μg/m L浓度范围内均有较好的抑制炎症因子NO的释放效果,且均呈一定的量效关系,其中总生物碱和氯仿浸膏部分呈现出了较好的抑制作用。4.借助CCK8法测定了各样品组对肝癌细胞Hep G2、乳腺癌细胞MCF-7、胃癌细胞BGC-803共3种癌细胞的细胞增殖影响,结果显示各样品组对本实验所选的实验细胞株均有较好的抗增殖效果,其中本实验中所有样品组整体对胃癌细胞BGC-803的抗增殖效果最好。5.利用柱层析等分离手段对单面针茎各极性部位进行化学成分分离,并通过核磁和质谱等技术对其中的20个化合物进行结构确证,它们分别是:β-谷甾醇1、大黄素甲醚2、白鲜碱3、鹅掌楸碱4、豆甾-4-烯-3-酮5、香草酸6、豆甾烷-3,6-二酮7、橙黄决明素8、氯化两面针碱9、茵芋碱10、合帕洛平11、莨菪亭12、异莨菪亭13、4-甲氧基-1-甲基-2-喹诺酮14、β-胡萝卜苷15、烟酸16、丁香酸葡萄糖苷17、赤藓醇18、尿嘧啶19和单面针碱20。其中化合物2、5~8、12~13、16~19均为首次从单面针植物中获得,化合物2、7、8、17和20为首次从芸香科植物中分离得到,化合物20为新化合物。本实验选择从抗菌、抗炎和抗癌三方面入手,尝试探寻单面针茎抗“炎-癌”活性的相关物质,本次实验研究结果将为单面针的后续研究与开发提供了理论基础。
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